[发明专利]针对猫疱疹病毒1型gD蛋白的特异性抗体及用途

说明书

本发明实施例公开了针对猫疱疹病毒1型gD蛋白的特异性抗体及用途，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区（VH）和轻链可变区（VL），其中，所述VH包含分别具有如SEQ ID NO:1‑3所示的氨基酸序列的HCDR1‑3，并且所述VL分别具有如SEQ ID NO:4‑6所示的氨基酸序列的LCDR1‑3。试验证明：本发明的猫疱疹病毒gD蛋白制备出能结合抗猫疱疹病毒的单克隆抗体，其与病毒的结合能力强，特异性好，稳定性强。

技术领域

本发明实施例涉及生物技术领域，具体涉及针对猫疱疹病毒1型gD蛋白的特异性抗体及用途。

背景技术

猫疱疹病毒1型（FHV-1）能够引起猫急性和高度接触性的传染病，临诊表现为结膜肿胀、眼鼻分泌物增多、打喷嚏、鼻塞、口腔溃疡、发热等一系列上呼吸道症状等，以上呼吸道感染症状为主。各年龄的猫都可发病，主要侵害幼仔猫，幼仔猫感染后症状严重，发病率可达100%。成年猫感染FHV-1的中和抗体阳性率为50%～75%，感染后大多耐过，感染猫康复后，FHV-1潜伏于三叉神经、视神经、扁桃体、颌下淋巴结、鼻甲骨以及口鼻眼分泌物内，造成持续性感染和潜伏性感染，还可再活化引起感染猫的二次发病，给该病的诊断与防治造成了困难。FHV-1在世界范围内广泛流行，对猫种群造成了严重威胁。

FHV属于疱疹病毒科（Feline Herpesvirus type1, FHV-1），病毒粒子直径120nm～180nm，核衣壳为外观呈六角形的正二十面体对称，核心、衣壳、囊膜三部分构成，外层由双层病毒膜包裹构成病毒囊膜，直径在135 nm-185 nm之间。FHV-1对环境的耐受性不高，对消毒剂，防腐剂和洗涤剂等非常敏感，氯仿、乙醚等有机溶剂均可杀灭猫疱疹病毒。通常情况下，FHV-1只能在37°C存活3h，56°C放置5 min即可灭活，但是在25°C条件下，病毒可以存活一个月，4°C条件下，病毒在至少5个月内都存在感染性。

FHV的线性双链DNA基因组全长126 kb～134 kb，G+C含量约50%，该基因组编码多种主要的包膜糖蛋白及非结构蛋白，其中已经报道相关功能的糖蛋白分别为gB、gC、gD、gG、gE、gI，这些糖蛋白在诱导体液免疫和细胞免疫中发挥巨大作用。gD囊膜糖蛋白是组成疱疹病毒囊膜的主要成分之一，存在于被病毒感染细胞的细胞膜上，在病毒复制和刺激机体产生中和抗体的过程中起重要作用，也能引起机体体液免疫和细胞免疫。FHV-1 gD蛋白的重组病毒免疫家兔，也能产生高滴度的中和抗体阻止病毒感染。另外，用杆状病毒表达系统表达的gD蛋白免疫小鼠，也可获得高滴度的病毒中和抗体。因此可以以gD蛋白为靶标进行FHV-1的诊断方法、试剂、亚单位疫苗、核酸疫苗及抗gD抗体药物的研究。猫疱疹病毒病还没有特效的治疗方法，疫苗免疫接种和合理的管理措施是预防该病最主要的方式。如何及时清除隔离感染动物对于防控猫疱疹病毒的传播是十分关键。

目前，病毒分离是鉴定FHV-1最可靠的诊断方法。虽然它不像PCR那样敏感，但却能检测到活的病毒粒子，而不仅仅是它的DNA。在原发性FHV感染中，病毒很容易从结膜、鼻咽拭子或刮片中分离。当FHV-1慢性感染时，利用病毒分离的检测方法会变得困难，但是病毒分离耗时长，所以一般不用于常规诊断FHV-1感染的疾病。

此外，猫疱疹病毒特异性蛋白可用免疫荧光抗体（IFA）法在结膜或角膜涂片或活检中检测到，可发现典型的核内疱疹病毒包涵体进行确诊。通常大多数猫在感染猫疱疹病毒三周时体内抗体水平最高，随后机体内抗体水平快速下降，因此，利用血清学试验检测FHV-1感染急性期和康复之后的双份血清的中和抗体效价，具有回顾性诊断意义。如何研发新型特异性抗体，以及利用该特异性抗体建立快速、灵敏的FHV-1血清抗体诊断方法是亟待解决的技术问题。

发明内容

为此，本发明实施例提供一种针对猫疱疹病毒1型gD蛋白的特异性抗体及用途。

本发明实施例提供特异性结合FHV-1 gD蛋白的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区（VH）和轻链可变区（VL），其中，