[发明专利]一种复合微生物菌剂、制备方法及应用方法

权利要求书

1.一种复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、菌种原料和培养基准备；

S2、菌种活化；

S3、菌种子液制备；

S4、菌种发酵；

S5、菌剂制备、混合。

2.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中菌种原料包括常温菌：酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌；高温菌：热噬淀粉芽孢杆菌、热葡糖苷酶地芽孢杆菌及苏旺脲杆菌；

培养基包括YPD固体培养基(酵母膏胨葡萄糖琼脂培养基)、LB固体培养基、YPD液体培养基(酵母浸出粉胨葡萄糖培养基)、LB液体培养基及发酵培养基。

3.根据权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S2具体地，

常温菌的活化：将酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌于无菌条件下分别接种于YPD固体培养基和LB固体培养基中培养；

高温菌的活化：将热噬淀粉芽孢杆菌、热葡糖苷酶地芽孢杆菌及苏旺脲杆菌于无菌条件下分别接种于LB固体培养基中培养。

4.根据权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S3具体地，在无菌条件下，将活化的酿酒酵母菌接种于装有YPD液体培养基的锥形瓶中，将地衣芽孢杆菌接种于装有LB液体培养基的锥形瓶中培养，获得对应菌种子液；将活化的热噬淀粉芽孢杆菌、热葡糖苷酶地芽孢杆菌、苏旺脲杆菌分别接种于装有LB液体培养基的锥形瓶中培养，获得对应菌种子液。

5.根据权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S4具体地，将常温菌中酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌混合均匀后，接种于发酵培养基1中培养，获得初步的常温菌种制剂；

将高温菌热噬淀粉芽孢杆菌接种于发酵培养基1中培养，将热葡糖苷酶地芽孢杆菌、苏旺脲杆菌混合均匀后，接种于发酵培养基1中培养，然后将二者混合均匀获得初步的高温菌种制剂。

6.根据权利要求5所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S4还包括：将获得的常温菌种制剂、高温混合菌种制剂分别接种于固体发酵培养基2中，分别在常温、60℃条件下进行放大发酵培养3～7天，检测菌种发酵进程，待菌落数达到10^10cfu/g停止发酵，获得对应的菌剂半成品。

7.根据权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S5具体地，将发酵后获得的常温菌剂制备成粉末状的常温复合微生物菌剂1；将发酵后获得的高温菌剂制备成颗粒状的高温复合微生物菌剂2，然后将二者混合，制备成复合微生物菌剂。

8.根据权利要求7所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S5具体地，将发酵后获得的常温菌剂于28～32℃条件下风干至恒重，制备成粉末状的常温复合微生物菌剂1；将发酵后获得的高温菌剂进行风干至含水率为10％后用造粒机对其造粒，制备成颗粒状的高温复合微生物菌剂2，然后将二者按照1:2～1:5比例混合，制备成复合微生物菌剂。

9.一种复合微生物菌剂，其特征在于，采用权利要求1-5任一项所述制备方法制备的微生物菌剂，包括：

粉末状常温菌，包括酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌；

颗粒状高温菌，包括热噬淀粉芽孢杆菌、热葡糖苷酶地芽孢杆菌及苏旺脲杆菌；

以上菌株均具有降解有机大分子物质的功能。

10.一种复合微生物菌剂的应用方法，其特征在于，权利要求9所述的复合微生物菌剂用放置了12～48h的自来水稀释，稀释50～100倍后将稀释液均匀施用于处理对象表面，并充分搅拌均匀。