[发明专利]一种黑水虻防御素C-13326

说明书

本发明提供了一种黑水虻防御素C‑13326，所述黑水虻防御素C‑13326的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，还提供了黑水虻防御素C‑13326在抑制多重耐药舒伯特气单胞菌上的应用，本发明提供的黑水虻防御素C‑13326可应用于制备抗耐药性舒伯特气单胞菌类产品，用以应对耐药性舒伯特气单胞菌带来的严重危害。

技术领域

本发明属于生物制品领域，具体是涉及一种黑水虻防御素C-13326。

背景技术

黑水虻(Hermetia illucens L.)，也称亮斑扁角水虻，隶属于昆虫纲、双翅目、短角亚目、水虻科。黑水虻幼虫营腐生性生活，生活环境与蝇蛆类似，虫体常常暴露于高浓度有害微生物中，因此其幼虫体内含有极为强大的免疫系统和种类丰富的抗菌肽。抗菌肽是一类具有抗菌活性的小分子多肽，能够直接杀灭病原体或激活宿主免疫防御体系，在宿主对抗病原体入侵的免疫防御中起着重要的作用。在黑水虻抗菌肽中，防御素类的抗菌肽数量占比最多，研究表明黑水虻防御素对革兰氏阳性菌和阴性菌具有良好的抑菌效果。研究显示，从黑水虻分离得到的防御素类抗菌肽中，DLP3能抑制大肠杆菌生长，而且DLP2和DLP4经证实能抑制耐甲氧的金黄色葡萄球菌生长。由于我国部分规模化禽畜养殖业，水产养殖业中抗生素的长期滥用，一方面导致食品中抗生素残留超标，严重危害食品安全；另一方面也导致病原菌的耐药谱和抗药性不断提高，诱发“超级细菌”的滋生。舒伯特气单胞菌，作为水产养殖中一种常见的致病菌，也经常被报道出现不同程度的耐药，这严重影响对其的防治，给水产养殖业带来巨大的经济损失。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种黑水虻防御素。

本发明的目的还在于提供了一种黑水虻防御素C-13326在抑制多重耐药舒伯特气单胞菌上的应用。

为实现以上技术目的，本发明采用如下技术方案：

一种黑水虻防御素C-13326，所述黑水虻防御素C-13326的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

进一步的，所述黑水虻防御素C-13326的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

进一步的，所述黑水虻防御素C-13326基因的表达方法是首先构建毕赤酵母分泌载体与C-13326基因的重组质粒pPIC9K-C-13326，然后转化至毕赤酵母菌GS115中表达。

进一步的，所述黑水虻防御素C-13326在抑制多重耐药舒伯特气单胞菌中的应用。

相对于现有技术，本发明具有以下优势：

本发明公开了一种黑水虻防御素C-13326氨基酸序列，该序列通过基因工程、蛋白质工程等生物技术手段，采用毕赤酵母系统表达的黑水虻防御素C-13326纯度高，活性强，可以直接用于抗病原微生物感染的生物技术产品研发。

本发明为探讨黑水虻防御素的免疫防御机制奠定了基础，同时为进一步开发黑水虻抗菌肽资源提供理论依据。

本发明公开了黑水虻防御素C-13326对多重耐药舒伯特气单胞菌具有抑菌活性，分离的黑水虻防御素C-13326对多重耐药舒伯特气单胞菌有明显的抑菌圈，且抑菌圈直径大于10mm以上，属于敏感状态。本发明提供的黑水虻防御素C-13326可应用于制备抗耐药性舒伯特气单胞菌类产品，用以应对耐药性舒伯特气单胞菌带来的严重危害。

附图说明

构成本发明的一部分的附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：

图1为防御素C-13326基因转入到毕赤酵母体内；其中a为PCR扩增防御素C-13326基因产物的琼脂糖电泳图；b为pPIC9K质粒酶切谱；c为重组质粒酵母转化子琼脂糖电泳图；