[发明专利]miR-3074-5p作为宫内生长受限标志物和治疗靶点的应用

说明书

本发明公开了miR‑3074‑5p在作为宫内生长受限的检测标志物，以及作为治疗靶点筛选抑制剂的应用。本发明为宫内生长受限的检测和治疗提供了新的体内研究模型，为临床检测提供了新的生物标志物，也为该疾病的治疗提供了新的靶点，在宫内生长受限疾病中具有良好的临床应用价值。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体来说，是关于miR-3074-5p作为宫内生长受限标志物和治疗靶点的应用。

背景技术

炎症因子介导的母胎免疫耐受平衡状态对妊娠建立和维持至关重要，其失衡将导致不良妊娠结局。在动物和人类中进行的大多数相关研究表明，一定程度的子宫局部或全身性的炎症水平对胚胎着床和妊娠都是必要的。然而，如果在体内炎症状态失衡，变得过于微弱或过度，会导致如反复自然流产、宫内生长受限、先兆子痫、早产等妊娠并发症。近年来不断有研究探讨外周血中IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-17、IL-1β、MCP-1、IL-4、IL-10等炎症因子水平以及TH1/TH2型细胞因子平衡在临床反复植入失败、复发性流产、子痫前期、早产、妊娠期糖尿病等病理妊娠预测中的参考价值。然而，由于机体内免疫稳态调控的复杂性，不同炎症因子在妊娠中的作用还存在争议，需要进一步明确相关调控机制，因而外周血中炎症相关的生物标志物作为病理妊娠检测指标的应用还存在难度，急需新的特异性检测标志物的研究开发。

微小RNA(microRNAs，miRNAs)是一类由21～25个核苷酸组成的小分子非编码RNA，其主要是通过与靶基因转录产物mRNA的3′UTR特异性位点互补结合而抑制靶基因的表达，是表观遗传调控的重要机制之一。妊娠妇女血浆中miRNAs水平比未妊娠妇女显著升高，而这些miRNAs被认为来源于胎盘滋养层细胞所释放的外泌体，很有可能成为预测妊娠结局的特异性标志物。

miR-3074-5p是目前发现的一种miRNAs，参与多个靶基因的表达调控，在人体中序列为guuccugcugaacugagccag，小鼠中序列为guuccugcugaacugagccagu。目前关于miR-3074-5p的研究发现其与类风湿性关节炎、心肌纤维化等疾病相关，可作为诊断的潜在分子标记物。还有研究发现miR-3074-5p胎盘组织中miR-3074-5p的异常低表达可能通过诱导p27的表达而参与子痫前期的病理过程(顾艳,乔磊,范卓然,顾文文,盛红娜,王建梅,华绍芳,张璇.miR-3074-5p及其靶基因p27在子痫前期胎盘组织中的异常表达[J].中华生殖与避孕杂志,2021,41(09):812-821)。

发明内容

本发明在构建一种新的miR-3074-5p过表达小鼠模型的基础上，通过对miR-3074-5p过表达小鼠孕第7.5天外周血炎症因子水平的研究，发现miR-3074-5p过表达可以提高孕小鼠外周血中炎症因子的水平。接着，发明人通过对miR-3074-5p敲入小鼠模型孕第13.5天和孕第16.5天平均胚胎吸收率的研究，发现miR-3074-5p过表达导致小鼠胚胎宫内生长受限，也叫胎儿生长受限。尾静脉注射miR-3074-5p激动剂以及对人巨噬细胞体外诱导模型和小鼠原代骨髓诱导巨噬细胞模型过表达miR-3074-5p的实验进一步证实了上述结论。

基于以上发现，本发明提供了一种可作为宫内生长受限检测标志物和治疗靶点的生物标记物miR-3074-5p及其用途。

因此，本发明的第一个目的在于，提供miR-3074-5p的一种应用，用于作为宫内生长受限的检测标志物。

根据本发明，所述作为检测标志物是检测miR-3074-5p是否过表达。

作为本发明的miR-3074-5p的应用的进一步改进，所述作为检测标志物是用于制备诊断试剂或试剂盒。

根据本发明，所述诊断试剂或试剂盒是用于检测外周血中miR-3074-5p是否高表达。

本发明的第二个目的在于，提供miR-3074-5p的另一种应用，用于作为靶点筛选miR-3074-5p的抑制剂。