[发明专利]合成白藜芦醇的解脂亚洛酵母菌株及其应用在审
申请号: | 202211652095.6 | 申请日: | 2022-12-21 |
公开(公告)号: | CN116179383A | 公开(公告)日: | 2023-05-30 |
发明(设计)人: | 周景文;刘孟粟;陈坚;曾伟主;宁扬;余世琴 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/54;C12N15/60;C12N15/52;C12P7/22;C12R1/645 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 仇钰莹 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 合成 藜芦 解脂亚洛 酵母 菌株 及其 应用 | ||
1.一种合成白藜芦醇的解脂亚洛酵母工程菌,其特征在,以解脂亚洛酵母PO1f为出发菌株,在基因组上D17位点整合来源于Flavobacterium johnsoniae的酪氨酸解氨酶FjTAL,并表达来源于Petroselinum crispum的4-香豆酸辅酶A连接酶Pc4CL1和来源于Vitisvinifera的二苯乙烯合成酶VvSTS。
2.根据权利要求1或2所述的解脂亚洛酵母工程菌,其特征在于,在F1-3位点整合表达了莽草酸途径基因YlARO1,解除了莽草酸反馈抑制的YlARO4K221L与YlARO7G139S基因。
3.根据权利要求3所述的解脂亚洛酵母工程菌,其特征在于,以pYlxp为表达载体,表达所述Pc4CL1和VvSTS基因。
4.根据权利要求3所述的解脂亚洛酵母工程菌,其特征在于,所述Pc4CL1和VvSTS在基因组上整合表达。
5.根据权利要求4或5所述的解脂亚洛酵母工程菌,其特征在于,所述基因Pc4CL1和VvSTS融合表达。
6.根据权利要求5所述的解脂亚洛酵母工程菌,其特征在于,所述基因Pc4CL1和VvSTS通过连接肽GGGGS,(GGGGS)2,TPTP,(TPTP)2,EAAAK,(EAAAK)2,GSG,(GSG)2连接。
7.根据权利要求6所述的解脂亚洛酵母工程菌,其特征在于,利用启动子TEFin、2xUASTEFin、4xUASTEFin、6xUASTEFin、8xUASTEFin、12xUASTEFin或16xUASTEFin启动所述融合基因。
8.根据权利要求5所述的解脂亚洛酵母工程菌,其特征在于,利用启动子12xUASTEFin启动所述融合基因,并整合在所述解脂亚洛酵母PO1f基因组的AXP位点和/或D2位点。
9.一种发酵生产白藜芦醇的方法,其特征在于,将权利要求1~8任一所述的解脂亚洛酵母工程菌在培养基中,于在28~30℃发酵不少于96h。
10.权利要求1~8任一所述的解脂亚洛酵母工程菌,或权利要求8~9任一所述方法在食品、医药、化工领域生产含白藜芦醇或其衍生物的产品方面的应用。
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