[发明专利]单克隆抗体HIVmAb771及其编码基因和应用

说明书

本申请公开了单克隆抗体HIVmAb771及其编码基因和应用。本申请的单克隆抗体HIVmAb771由重链和与之配对的轻链组成；重链的CDR1、CDR2和CDR3的序列依序为“GYTFTFWG”、“ISPYSGNT”和“ARDSLRAKSMTSFDL”，轻链的CDR1、CDR2和CDR3的序列依序为“QSLRNSNGDTF”、“SGS”和“MQSLQIPRT”。本申请的单克隆抗体HIVmAb771，能有效中和多种亚型/重组模式的HIV‑1假病毒，为HIV‑1感染的检测和防治提供了一种新方案和途径。

技术领域

本申请涉及HIV-1中和抗体技术领域，具体涉及一种针对HIV-1 GP140蛋白的单克隆抗体及其编码基因和应用。

背景技术

HIV-1中和抗体能够有效阻止HIV-1结合并进入人的CD4+T细胞。因此，作为对HIV-1感染者的一种治疗手段，艾滋病研究领域一直在致力于开发强效的HIV-1广谱中和抗体。

最早通过噬菌体展示文库技术得到了单克隆抗体b12，但是仅能中和约40％的已知HIV-1病毒。从2010年开始，得益于单个B细胞分选和深度测序等技术的发展进步，已经从HIV-1感染者中分离出多种具有抗HIV-1广谱中和活性的人源单克隆抗体，如针对CD4结合位点的VRC01，针对可变区V1/V2和V3的PG9/PG16和PGT121，针对近膜区(MPER，membraneproximal external region)的10E8抗体和针对gp120-gp41交界处的35O22等。

鉴于HIV-1存在多种进化枝且在世界范围内不同地区存在不同的主要流行株，组合应用两种或更多种广谱中和抗体显然是一种更具潜力的治疗策略。因此，艾滋病研究领域仍需要开发出新的强效广谱反应性HIV-1中和抗体。

发明内容

本申请的目的提供一种新的针对HIV-1GP140蛋白的单克隆抗体及其编码基因和应用。

为了实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：

本申请的第一方面公开了一种针对HIV-1GP140蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体为HIVmAb771，单克隆抗体HIVmAb771由重链和与之配对的轻链组成；单克隆抗体HIVmAb771的重链的CDR1、CDR2和CDR3的序列依序为“GYTFTFWG”、“ISPYSGNT”和“ARDSLRAKSMTSFDL”，轻链的CDR1、CDR2和CDR3的序列依序为“QSLRNSNGDTF”、“SGS”和“MQSLQIPRT”。

需要说明的是，本申请的关键在于，以HIV-1GP140蛋白作为诱饵，通过流式细胞术从外周血中分离特异性单个记忆B细胞，利用RT-PCR和巢式PCR技术从中克隆、鉴定获得1株全人源单克隆抗体，即HIVmAb771。这株HIV-1单克隆抗体，能有效中和多种亚型/重组模式的HIV-1假病毒，具有高效、广谱性、多用途的特点，可以作为血清学诊断HIV-1的检测抗体，也为HIV-1的治疗提供了强有力的工具。

本申请的一种实现方式中，单克隆抗体HIVmAb771的重链可变区序列为Seq IDNo.1所示序列，轻链可变区序列为Seq ID No.2所示序列。

需要说明的是，以上具体序列的重链可变区和轻链可变区只是本申请的一种实现方式中具体采用的单克隆抗体序列；可以理解，对于单克隆抗体而言，影响其与抗原决定簇形成精密互补的区域是互补性决定区(缩写CDR)，具体的，即重链的CDR1、CDR2和CDR3，以及轻链的CDR1、CDR2和CDR3；因此，只要保障本申请的重链和轻链的CDR1、CDR2和CDR3序列不变，都能够基本实现本申请单克隆抗体的功能和作用。也就是说，本申请的HIV-1单克隆抗体，其具体序列不仅限于Seq ID No.1所示序列的重链可变区和Seq ID No.2所示序列的轻链可变区。

本申请的第二方面公开了一种编码HIV-1单克隆抗体的核酸片段，该核酸片段编码本申请的单克隆抗体中的单克隆抗体HIVmAb771的重链和轻链。