[发明专利]一种多突变的人原代肺癌细胞株及其应用

说明书

本发明公开了一种多突变的人原代肺癌细胞株，来源于临床肺腺癌手术切除样本，所述人原代肺癌细胞株命名Lu‑01‑1534，保藏编号为CCTCC NO：C2022167，保藏日期为2022年8月25日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心。Lu‑01‑1534具有EGFR、L858R突变，RET扩增。本发明通过提供一株具有中国人基因特征的细胞株Lu‑01‑1534，可在培养基中进行体外培养，且体外培养生长快速稳定、能连续传代，进而方便建立人肺癌体内模型；免疫缺陷鼠皮下成瘤性好，为药物的体内试验提供了重要的保证，进而为制备、筛选、评价抗肿瘤药物提供基础。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种多突变的人原代肺癌细胞株及其应用。

背景技术

肺癌作为目前世界上最常见的癌症类型，是导致与癌症相关疾病死亡率升高的主要原因。严重威胁人类健康和生命。根据临床组织学类型，肺癌可被细分为鳞状上皮癌、腺癌、大细胞未分化癌和小细胞未分化癌这四种不同的类型，而在这四种不同的类型之中，小细胞肺癌无论是从疾病临床表现、中晚期转移程度还是临床治疗原则上，均与其他几种肿瘤类型有所区别，因此，我们将除小细胞肺癌外的这三种不同的肺癌类型总结起来归类统称为非小细胞肺癌。肺腺癌约占非小细胞肺癌的50％。患有肺腺癌的患者5年生存率非常低，大约有75％的患者在临床首次确诊为该疾病时肿瘤已经发展并进入了中晚期。

随着人们认识到肺癌不是突然的转变，而是遗传和遗传表观学逐渐变化的结果，对于肺腺癌相关基因，即驱动基因和抑癌基因的研究取得了一定的进展。比较重要的基因突变包括表皮生长因子(EGFR)基因突变、间变性淋巴瘤激酶(ALK)重排、c-ros原癌基因1酪氨酸激酶(ROS1)基因重排和Kirsten大鼠肉瘤病毒基因同源物(KRAS)突变，这些生物标志物也被认为是目前必须检测的基因。其中ALK基因重排被认为是肺腺癌患者对奥西替尼产生耐药的关键机制。肺腺癌一旦明确基因突变的类型，其临床鉴别、诊断和后续治疗的选择会变得相对容易。因此，用具有EGFR和ALK基因突变的临床肺腺癌患者的肿瘤组织分离培养人原代肺癌细胞系，对研究肺腺癌发生发展和耐药机制以及筛选治疗肺腺癌的候选药物具有重要作用。

而中国人的肺癌基因图谱和西方人存在明显不同：高的EGFR突变率，低的KRAS突变率，HBV的合并感染多等等。而当前用来进行肺癌研究的细胞均来自外国细胞库，这些细胞已经被研究人员广泛投入研究中，开发出了多种肺癌靶向疗法的药物。但是针对具有中国人基因特征突变的肺癌和耐药性肺癌的治疗亟需具有中国人基因特征的肺癌细胞株。因此，建立具有中国人特征性基因改变的肺癌细胞株对于研究中国人肺癌发生发展机理及筛选个性化的人原代肺癌的候选药物具有必不可少的重要作用，同时，具有中国人基因特征的肺癌细胞可以作为精准化医疗的工具，提高中国肺癌患者的生存期。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一株具有中国人基因特征的细胞株Lu-01-1534，为研究病人体内肿瘤的发生、耐药机制及治疗提供良好的体内和体外模型，从而促进肺癌的基础研究、预防及临床治疗。

为解决上述技术问题，本发明提供一种多突变的人原代肺癌细胞株，来源于临床肺腺癌手术切除样本，所述人原代肺癌细胞株命名Lu-01-1534，保藏编号为CCTCC NO：C2022167，保藏日期为2022年8月25日，保藏单位地址为中国武汉武汉大学, 保藏单位为中国典型培养物保藏中心。

具体的，所述Lu-01-1534具有EGFR、L858R突变，RET扩增。

具体的，所述Lu-01-1534具有RPS6KB2，MST1R，ARHGEF28，ALK，MAP3K14，GLI1，ERBB2，DOT1L，DNMT1，AURKA的原癌基因突变和FAT1，FANCA，TET，RECQL4，HNF1A，MAP3K1，ETAA1，BARD1，CIC，ANKRD11的抑癌基因突变。

本发明还提供了将权利要求1所述人原代肺癌细胞株Lu-01-1534在构建肺腺癌动物模型中的应用。