[发明专利]一种基于磁性共价有机框架材料构建生物传感器检测乙型肝炎病毒的方法

权利要求书

1.一种基于磁性共价有机框架材料构建生物传感器检测乙型肝炎病毒的方法，其特征在于，所述方法包括Au@ZnFe₂O₄@COF纳米复合材料以及中间产物材料：ZnFe₂O₄@COF。

2.根据权利要求1所述的一种基于磁性共价有机框架材料构建生物传感器检测乙型肝炎病毒的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：

步骤1)合成ZnFe₂O₄@COF，并表征；

步骤2)合成并表征Au@ZnFe₂O₄@COF纳米复合材料；

步骤3)合成CP@Au@ZnFe₂O₄@COF纳米复合材料；

步骤4)合成CuO纳米材料；

步骤5)合成LP@CuO。

3.根据权利要求2所述的一种基于磁性共价有机框架材料构建生物传感器检测乙型肝炎病毒的方法，其特征在于，

所述步骤1)具体为：

(1)合成ZnFe₂O₄，用乙二醇溶解六水合氯化铁和无水氯化锌，形成透明溶液，随后加醋酸钠和聚乙二醇20000；混合液剧烈搅拌后，转移到不锈钢高压釜中，在200℃条件下反应6-10h，反应终止后自然冷却至室温；将产物用乙醇和水清洗数次，黑色产物在60℃真空环境下干燥4-8h，收集样品用于后续实验和表征；

(2)进一步合成ZnFe₂O₄@COF，取1，3，5-三(4-氨基苯基)苯(TAPB)，对苯二甲醛(TPA)和ZnFe₂O₄，用二甲基亚砜溶解；超声分散，超声下加入无水乙酸，室温反应；磁铁收集ZnFe₂O₄@COF，分别用四氢呋喃和甲醇清洗，60℃真空干燥，收集样品用于后续实验和表征。

4.根据权利要求1所述的一种基于磁性共价有机框架材料构建生物传感器检测乙型肝炎病毒的方法，其特征在于，

所述步骤2)具体为：

(1)合成AuNPs，将HAuCl₄溶液加入到去离子水中，在80-120℃下加热搅拌，加入柠檬酸钠溶液，回流20-40min，直至溶液变为酒红色，自然冷却至室温，并于4℃下储存；

(2)将得到ZnFe₂O₄@COF粉末样加水配制成ZnFe₂O₄@COF溶液，取ZnFe₂O₄@COF溶液滴加在金纳米粒子AuNPs溶液中，4℃搅拌12h，离心洗涤，得到Au@ZnFe₂O₄@COF纳米复合材料。

5.根据权利要求1所述的一种基于磁性共价有机框架材料构建生物传感器检测乙型肝炎病毒的方法，其特征在于，所述步骤3)具体为：将乙肝病毒捕获探针CP加入到Au@ZnFe₂O₄@COF纳米复合材料溶液中，4℃震荡12h，加入己硫醇HT封闭，磁吸附洗涤备用。

6.根据权利要求1所述的一种基于磁性共价有机框架材料构建生物传感器检测乙型肝炎病毒的方法，其特征在于，所述乙肝病毒的测定步骤为：

(1)取CP@Au@ZnFe₂O₄@COF加入离心管内，加入HBV DNA靶标物，室温孵育，使用PBST溶液磁吸附清洗；

(2)加入LP@CuO，室温孵育，使用PBST磁吸附清洗；

(3)加入MES缓冲溶液，同时加入4-AP和2，4-DP，在某温度环境下显色；

(4)吸取上清液使用紫外分光光度计测量400-700nm处的吸收峰值，并记录510nm处的最高吸收峰值，记录并绘制工作曲线。