[发明专利]一种亚硒酸盐还原菌及其合成纳米硒的方法与应用

权利要求书

1.Metasolibacillus fluoroglycofenilyticus ES129，保藏编号：GDMCC No.62529。

2.权利要求1所述的Metasolibacillus fluoroglycofenilyticus ES129在合成纳米硒中的应用。

3.一种亚硒酸盐还原菌生物合成纳米硒的方法，其特征在于，包括以下步骤：

利用Metasolibacillus fluoroglycofenilyticus ES129还原含硒的盐合成纳米硒。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，具体步骤为：

(1)菌种活化：将Metasolibacillus fluoroglycofenilyticus ES129接种于固体培养基中，进行恒温培养；

(2)种子培养：将活化后的Metasolibacillus fluoroglycofenilyticus ES129接种到液体培养基中进行振荡培养，得到种子培养液；

(3)发酵培养：将种子培养液接种到含亚硒酸钠的液体发酵培养基中，振荡培养Metasolibacillus fluoroglycofenilyticus ES129合成纳米硒。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，是Metasolibacillusfluoroglycofenilyticus ES129合成纳米硒得到的菌悬液进行低速离心，收集沉淀，并用0.5-1.5％的NaCl洗涤2-3次后，将沉淀重悬浮于TE缓冲液中，加入溶菌酶对菌体细胞壁进行破坏，随后对菌体进行超声破碎，低速离心，弃沉淀，收集含纳米硒的上清液，对上清液进行高速离心，收集沉淀，并用去离子水清洗沉淀2-3次，获得纯净的纳米硒颗粒。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中将Metasolibacillusfluoroglycofenilyticus ES129接种于固体培养基，其接种量为体积比1％-5％，固体培养基成分为胰蛋白胨5-15g/L、酵母提取物2-10g/L、氯化钠5-15g/L、琼脂粉15-20g/L，培养条件为30-35℃培养12-36h，直至形成直径约3mm的菌落。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)将活化后的Metasolibacillusfluoroglycofenilyticus ES129接种到液体培养基中，其接种量为1-5％，液体培养基成分为胰蛋白胨5-15g/L、酵母提取物2-10g/L、氯化钠5-15g/L，培养条件为30-35℃、150-200r/min、振荡培养12-36h。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中将种子培养液接种到含亚硒酸钠的液体发酵培养基，其接种量为1-5％，液体发酵培养基的成分为胰蛋白胨5-15g/L、酵母提取物2-10g/L、氯化钠5-15g/L、亚硒酸钠1-20mM，培养条件为30-35℃、150-200r/min、振荡培养24-72h。

9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述低速离心条件为3000-8000*g、5-15min，高速离心条件为10000-20000*g、10-30min。

10.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的溶菌酶，终浓度为5-15mg/mL，37℃温育0.5-1.5h；所述的对菌体进行超声破碎的条件为：置于冰上进行超声、功率设置为功率设置为100-180W、超声运行5s暂停5s、总运行时间为20-40min。