[发明专利]一种仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量测定方法

说明书

本发明公开了仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的检测方法，仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的测定包括以下步骤：步骤1、对照品溶液的制备；步骤2、供试品溶液的制备；步骤3、分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，蒸发光散射检测器测定。本发明建立的检测方法，分析快速、准确，阴性样品没有干扰，有较强的的专属性，良好的重现性和稳定性，所得到的色谱图色谱峰峰型较好，能客观评价仁术健胃颗粒的质量。

技术领域

本发明涉及一种中药制剂中有效成分的含量测定方法，具体涉及仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法。

背景技术

仁术健胃颗粒由全国名中医、江苏省中医院(国家中医脾胃病临床研究基地)脾胃病科学术带头人单兆伟教授研究开发，四十余年来单兆伟教授通过系列临床及基础研究总结提出萎缩性胃炎胃黏膜癌前病变的主要病机特点是“气虚血瘀热郁”，制定“益气活血清热”为主要治疗法则，研究开发仁术健胃颗粒，该方由黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草制成。

黄芪为处方中君药，具有益气健脾，治疗脾虚之本。现代研究表明黄芪含有多种化学成分，如皂苷类、黄酮类、多糖类等，其所含的三萜皂苷类化合物-黄芪甲苷，是黄芪的主要的有效成分，也是仁术健胃颗粒的主要有效成分。因此，检测黄芪甲苷的含量能有效的控制仁术健胃颗粒的质量。现有技术中黄芪甲苷的测定方法一般为药典提供黄芪药材中黄芪甲苷的测定方法，但由于仁术健胃颗粒处方化学成分复杂，活性成分众多，采用药典方法测定时存在阴性干扰，因此在测定黄芪甲苷时，如何除去干扰因素，精准的测定含量是亟待解决的问题。

发明内容

为解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明的目的在于提供一种用高效液相-蒸发光散射检测器检测仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量的方法。

本发明的技术方案如下：

一种仁术健胃颗粒中黄芪甲苷含量测定方法，包括以下步骤：

步骤1、对照品溶液的制备：

精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成在浓度范围内设置梯度浓度的多个对照品溶液；

步骤2、供试品溶液的制备：

取质量为M1的待测仁术健胃颗粒，置索氏提取器中，加甲醇浸泡、回流，得到提取液，取提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水溶解后，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇提取液，用氨试液提取，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶解后，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水洗脱，弃去水液，再用40％乙醇洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，再用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至体积为V1的量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

步骤3、高效液相-蒸发光散射检测器检测：

分别精密吸取步骤1制备的各对照品溶液和步骤2制备的供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，蒸发光散射检测器测定，以峰面积的自然对数值为纵坐标，以进样量的自然对数值为横坐标，外标两点法计算，即得供试品中黄芪甲苷的浓度C1，按照公式C＝C1×V1/M1计算出待测仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的含量，

液相色谱条件为：

色谱柱填充剂：辛烷基硅烷键合硅胶；

流动相：体积比为76：24的甲醇-水；

柱温：30℃；

流速：1.0mL/min；

蒸发光散射检测器条件：

漂移管温度82℃；

载气流量1.95SLPM。

进一步的，步骤1所述浓度范围为0.09～0.98mg/ml。