[发明专利]用于磺胺二甲氧嘧啶检测的电致化学发光适体传感器及检测方法

权利要求书

1.一种用于磺胺二甲氧嘧啶检测的电致化学发光适体传感器，其特征在于，用于磺胺二甲氧嘧啶检测的电致化学发光适体传感器的构建方法包括如下步骤：

将干燥的电极在 H₂SO₄中进行电化学活化，然后用超纯水冲洗后晾干得到清洁的玻碳电极，将Ce-MOF/PEI和AuNPs溶液滴加到清洁的玻碳电极表面上，室温干燥；然后滴加dsDNA复合物，室温孵育过夜；再滴加6-巯基-1-己醇（MCH）溶液，室温孵育30-50 min；再滴加磺胺二甲氧嘧啶溶液，室温孵育1-2 h；再滴加Zn-TBAPy/SP信号探针溶液，室温孵育1-3 h，即得到用于磺胺二甲氧嘧啶检测的电致化学发光适体传感器；

所述Zn-TBAPy/SP信号探针溶液的制备方法为：

EDC和NHS溶于MES溶液中得到MES缓冲液，将MES缓冲液加入到制得的0.5-2 mg/mL Zn-TBAPy分散液中，室温搅拌20-40 min后，加入信号探针（SP），冰浴搅拌10-12 h，然后离心，水洗，将沉淀物重新分散于超纯水中，即得到Zn-TBAPy/SP信号探针溶液；

Zn-TBAPy分散液的制备方法为：

Zn(NO₃)₂·6H₂O、H₄TBAPy加入DMF和HNO₃的混合液中，超声处理3-6 min，随后，将其转移到圆形烧瓶中，在110-130 ℃下加热回流20-25 h；最后，将得到的黄色沉淀用DMF离心洗涤，置于80-120 ℃的真空干燥箱；干燥后，加入超纯水分散即得Zn-TBAPy分散液；

Ce-MOF分散液的制备方法为：

Ce(NO₃)₃·6H₂O加入超纯水中，超声处理2-4 min， 随后， H₃BTC溶解在水-乙醇混合物（v / v = 1:1）中，在磁力搅拌下将H₃BTC溶液滴入至Ce(NO₃)₃·6H₂O 溶液中，置于50-70 °C的水浴中反应1-2 h；最后，将得到的白色沉淀离心洗涤数次，置于50-70 ℃干燥；然后加入超纯水分散得到Ce-MOF分散液；

Ce-MOF/PEI分散液的制备方法为：

将PEI加入到上述所制备的Ce-MOF分散液中，在室温下搅拌10-15 h，然后离心洗涤，即得Ce-MOF/PEI分散液；

dsDNA复合物的制备方法为：

将氨基修饰的捕获探针(CP)和适配体(Apt)混合，在80-100 °C下加热3-6 min，冷却到60-70 °C后再反应10-15 min，随后自然冷却至室温，最后得到dsDNA复合物。

2.如权利要求1所述的电致化学发光适体传感器，其特征在于，AuNPs的制备方法为：

1％HAuCl₄溶液加入至100 mL超纯水中煮沸，然后迅速加入2.5 mL 1％柠檬酸三钠溶液继续煮沸15 min，冷却后用超纯水恢复至原体积得透明的酒红色溶液即为金纳米粒子(AuNPs)。