[发明专利]一种β-胶原降解序列校准品抗原合成序列

说明书

本发明设计了一种β‑胶原降解序列校准品抗原合成序列，其氨基酸序列如式（1）所示。该序列经修饰后经过固相合成并与载体蛋白偶联得到融合蛋白作为人工合成抗原，经罗氏公司试剂检测后，准确性、一致性较高，且具有操作简单、成本低廉等优点，具有工业化生产的可行性。

技术领域

本发明涉及生物医药相关技术领域，具体涉及一种β-胶原降解序列校准品抗原合成序列。

背景技术

骨质疏松症是一种以低骨量和骨组织微结构恶化为特征的疾病，导致骨折风险增加。虽然可以通过使用双X射线吸收测定法(DXA)测量骨矿物质密度(BMD)来估计骨量水平，但其测量值并不能捕获骨折的所有危险因素。

当前可以通过测量血清免疫标志物，可以轻松且无创地评估骨骼更新的定量变化。I型胶原的β异构化C末端端肽(β-CTX)已被指定为用于骨质疏松症的参考。所有用于β-CTX的商业测定都是在胶原分子的α1链的C-末端端肽区域中检测glu-lys-ala-his-asp-gly-gly-arg(EKAHD-β-GGR)八肽序列。

目前血液中β-CTX的商业测定给出的结果一致性较差，在人体内存在多种结构形式，有单链、双链和多链等。由于β-CTX分子(EKAHD-β-GGR)的结构具有良好的表征，因此可以合成参考标准品制备。IFCC/IOF骨代谢联合委员会的目标是实现血液中β-CTX的所有商业化检测方法的标准化。迄今为止，未有现有技术公开β-CTX双链的详细结构。

因此，本领域迫切需要开发一种β-CTX双链的氨基酸合成序列，用于配置β-CTX校准品。

发明内容

本发明的目的是提供一种β-胶原降解序列校准品抗原合成序列，并描述了一种I型胶原的β异构化C末端端肽双链的氨基酸序列。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

在骨成熟过程中，I型胶原蛋白中I链的620-633氨基酸位置中的8个氨基酸的C端肽的α-天冬氨酸转变成β型天冬氨酸(β-CTX)，具体序列如SEQ ID NO:1所示，SEQ ID NO:1：

本发明涉及的一种β-胶原降解序列校准品抗原合成序列，其氨基酸序列的结构如式(1)所示：

优选地，所述氨基酸序列为双链。

优选地，所述双链的两个赖氨酸之间用一个氨基酸连接。

优选地，所述氨基酸为谷氨酸(E)。

优选地，所述双链可以直接通过化学合成得到。

本发明具有以下有益效果：

本发明提供了一种β-胶原降解序列校准品抗原合成序列，该序列经修饰后经过固相合成并与载体蛋白偶联得到融合蛋白作为人工合成抗原，经罗氏公司试剂检测后，准确性、一致性较高，且具有操作简单、成本低廉等优点，具有工业化生产的可行性。

附图说明

图1为本发明的检测数据示意图。

具体实施方式

结合以下具体实施例对本发明作进一步的详细说明。实施本发明的过程、条件、实验方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本发明没有特别限制内容。实施例中未注明的具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。

I型胶原的β异构化C末端端肽(β-CTX)的氨基酸序列如下方SEQ IDNO:1所示，本实施例中设计了一系列由SEQ ID NO:1编码的多肽序列，具体序列如SEQ ID NO:2-SEQ IDNO:9所示。

SEQ ID NO:1：