[发明专利]一种扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法

权利要求书

1.一种扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、高温条件以结实率为评价指标，从不同水稻品种中初步筛选出扬花期耐高温候选水稻品种；次年种植后，对候选水稻品种剑叶离体叶盘进行高温胁迫下氧爆发检测，根据绘制的活性氧含量动态曲线从候选水稻品种中鉴定出扬花期耐高温品种；

S2、采用化学诱变试剂对步骤S1中鉴定出的耐高温水稻品种进行化学诱变，并对突变体库进行高温胁迫表型鉴定，初步筛选出扬花期高温敏感突变体植株；

S3、对步骤S2中初步筛选出的高温敏感突变体植株进行剑叶离体叶盘高温胁迫下氧爆发检测，根据活性氧含量动态曲线，从步骤S2中的突变体植株中筛选出扬花期高温敏感突变体水稻植株；

所述剑叶离体叶盘高温胁迫下氧爆发检测，是在水稻剑叶上采集叶盘并进行预处理后，将叶盘置于活性氧检测液中，在检测温度为38～42℃的条件下，利用酶标仪实时监测叶盘释放的活性氧含量。

2.根据权利要求1所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，叶盘处理过程包括将叶盘从剑叶上取下后置于无菌水中，然后置于室温黑暗条件下孵育过夜。

3.根据权利要求1所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，酶标仪检测方式设置为冷发光模式，检测频率设置为10～30秒/次，检测时长设置为25～45分钟。

4.根据权利要求1所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，步骤S1中扬花期耐高温水稻品种鉴定方法如下：

将待筛选水稻在夏季高温期生长至抽穗扬花期，将因生育期过长或过短导致扬花期未能遇上高温的品种剔除，待剩余水稻成熟后，对单兜进行结实率考察，选择平均结实率大于85％的品种为扬花期耐高温候选水稻品种；次年，将筛选出的扬花期耐高温候选品种以相同方式种植，待其生长至扬花期，对候选水稻品种剑叶离体叶盘进行高温胁迫下氧爆发检测，根据绘制的活性氧含量动态曲线从候选水稻品种中鉴定出扬花期耐高温品种。

5.根据权利要求1所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，步骤S2化学诱变试剂为烷基磺酸盐和烷基硫酸盐、亚硝基烷基化合物、次乙胺类和环氧乙烷类以及芥子气类氮芥类、硫芥类中的一种。

6.根据权利要求1所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，步骤S2中初步筛选出扬花期高温敏感突变体的方法如下：

(1)通过预试验鉴定出化学诱变剂的最佳诱变浓度，并对选出的耐高温水稻品种进行批量诱变后正常种植至水稻成熟；

(2)对(1)中的水稻成熟株进行单株收种，得到M1代突变体库种子；

(3)将(2)中的M1代突变体和扬花期耐高温品种进行正常的大田种植至抽穗扬花期，利用夏季自然高温进行筛选，待水稻成熟后，选取与扬花期耐高温品种相比结实率显著下降株独立收种，初步筛选出扬花期高温敏感突变体。

7.根据权利要求6所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，步骤(1)中鉴定最佳化学诱变剂的诱变浓度时，处理种子的化学诱变剂浓度范围为0.1％-1％，诱变完成后进行催芽，选择发芽率接近50％的化学诱变剂浓度作为诱变浓度。

8.根据权利要求1所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，步骤S3中进行剑叶离体叶盘高温胁迫下氧爆发检测后，通过与步骤S1中的扬花期耐高温水稻品种的剑叶离体叶盘氧爆发实时监测曲线比较，判断是否为扬花期高温敏感突变体水稻植株。

9.根据权利要求1所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，步骤S1中选择活性氧含量动态曲线保持在低水平波动的水稻品种，作为扬花期耐高温水稻品种。

10.根据权利要求1所述的扬花期高温敏感水稻突变体的筛选方法，其特征在于，步骤S3中选择活性氧含量动态曲线快速上升，达到峰值后趋于平衡并维持在峰值水平的水稻品种，作为扬花期高温敏感突变体水稻植株。