[实用新型]一种miRNAs梅毒全周期检测试剂盒

说明书

本实用新型属于miRNA检测领域，尤其是涉及一种miRNAs梅毒全周期检测试剂盒，由塑料外壳和试纸条组成，试纸条包括PVC底板，PVC底板上依次设有样品垫、玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜和吸水纸，玻璃纤维素膜上设置有胶体金标记的鼠lgG抗体和被HRP酶/特异性短核酸序列双标记的三种胶体金，硝酸纤维素膜上设有质控线和三条检测线，质控线和三条检测线平行设置，三条检测线上分别包被有探针，质控线上包被有抗鼠lgG多克隆抗体，检测试纸条通过特异性检测每期梅毒患者与正常人相比外周血中表达水平显著上调的差异miRNAs来对梅毒进行分期检测，具有高特异性、高灵敏度、假阴/阳性率低、检测结果更准确、操作简便等优点。

技术领域

本实用新型属于属于miRNAs检测技术领域，具体涉及一种miRNAs梅毒全周期检测试剂盒。

背景技术

梅毒( Syphilis )是由苍白（梅毒）梅毒螺旋体引起的慢性、全身性性传播疾病(Sexually Transmitted Disease ,STD ),是经典的性病之一。可严重影响身体健康，能使几乎全身各种组织器官发生病变，感染早期主要侵犯皮肤黏膜，晚期可侵犯心血管及中枢神经系，导致严重的后遗症。根据卫建委统计，截止到2021年10月，全国梅毒感染者约300万，年发病率为33.0831/10万，我国梅毒发病率呈上升趋势。2009年至今，梅毒在全国甲乙类传染病发病排序不断上升，一直居第3位，仅次于乙型肝炎和肺结核，在一些城市和省份如北京、上海等，已居第1位。梅毒不仅严重威胁着人们的身心健康，同时严重破坏了社会的安宁与和谐。

而目前对梅毒的检测，市面上主要有血清学检测和梅毒特异性抗体检测两种，虽然使梅毒筛查检测的能力得到了提高，但是都存在共性的缺点：无法对梅毒进行分期诊断，且存在灵敏度低、特异性差、漏检、误检、假阴性等问题，造成疾病的错判，给临床治疗带来了极大的困难。

实用新型内容

为了解决目前市面上的梅毒检测试剂盒均无法对梅毒进行分期诊断，且存在灵敏度低、特异性差、漏检、误检、假阴性等问题，本实用新型提供了一种miRNAs梅毒全周期检测试剂盒，能对梅毒进行全周期检测，且特异性强，灵敏度高，具有重要现实意义。

为实现上述目的，本实用新型所采用的技术方案为：一种miRNAs梅毒全周期检测试剂盒，包括底壳和盖板，盖板扣合在底壳上组成外壳，外壳内装有试纸条，通过试纸条对梅毒进行筛查。

试纸条包括PVC基板，PVC基板的一端固定有样品垫，PVC基板的另一端固定有吸水纸，PVC基板上还布置有玻璃纤维素膜和硝酸纤维素膜，玻璃纤维素膜紧贴样品垫布置，硝酸纤维素膜置于玻璃纤维素膜与吸水纸之间。

玻璃纤维素膜上设有胶体金标记的鼠lgG抗体、被HRP酶/特异性短核酸序列（即可与待测梅毒目标miRNA稳定结合的DNA配对序列 ）双标记的三种胶体金；胶体金标记的鼠lgG单克隆抗体的制备方法为：取鼠lgG单克隆抗体和胶体金混合，经温育、封闭，即得胶体金标记的鼠lgG抗体。本试剂盒采用分子杂交技术，胶体金技术和酶联免疫分析技术来进行相关检测。

金纳米颗粒表面的HRP(辣根过氧化物)与TMB/H2O2底物液发生反应，可产生不溶性的蓝色固体，并沉积在金纳米颗粒表面，使检测线颜色加深并易于观察。

硝酸纤维素膜上依次平行布置有质控线、一期梅毒检测线、二期梅毒检测线和三期梅毒检测线，一期梅毒检测线上设有第一探针，二期梅毒检测线上设有第二探针，三期梅毒检测线上设有第三探针，探针具有种属特异性且稳定表达。质控线靠近吸水纸布置，质控线上设有抗鼠lgG多克隆抗体。

当试纸条上只有质控区出现红色条带时，而检测区没有出现红色条带时，则检测结果为阴性，表示检测者不患有梅毒。当试纸条上出现两条条带:一条位于质控区，一条位于S1区时，则表示检测者患一期梅毒；一条位于质控区，一条位于S2区时，则表示检测者患二期梅毒；一条位于质控区，一条位于S3区时，则结果表示检测者患三期梅毒。显示结果只有质控区无条带，则本次检测无效。