[发明专利]一种利用油酸培养脂肪间充质干细胞的方法

权利要求书

1.一种油酸在脂肪间充质干细胞培养方法中的应用。

2.一种利用油酸培养脂肪间充质干细胞的方法，其特征在于，步骤如下：

S1、取培养至1-3代的脂肪间充质干细胞，接种到培养基中；

S2、向传代细胞中，加入消化酶，消化3-5min，收集细胞，离心，弃上清，按1:3的传代比例将干细胞接种到新的培养皿或孔板中；

S3、将1g油酸溶于DMSO中，制成0.5mol/L的浓储液，再加入到含DMEM/F12、15％FBS、0.1％PS的培养基中，制成油酸条件培养液；

S4、预处理：取3-5代的传代细胞，接种至油酸条件培养液中，培养1-5代；

S5、诱导成脂分化：添加成脂诱导剂至已接种预处理传代细胞的培养液中，每隔48h换一次培养液，继续培养1-5代。

3.根据权利要求1所述的一种利用油酸培养脂肪间充质干细胞的方法，其特征在于：步骤S1中，所述培养基所含成分为DMEM/F12、15％FBS、0.1％PS。

4.根据权利要求1所述的一种利用油酸培养脂肪间充质干细胞的方法，其特征在于：步骤S2中，所述传代细胞为汇合度达到80-90％的细胞；所述消化酶为0.25％的胰酶；所述离心速率为1500rpm，离心时间为5min。

5.根据权利要求1所述的一种利用油酸培养脂肪间充质干细胞的方法，其特征在于：步骤S3中，所述油酸条件培养液的浓度为0.01-1mmol/L。

6.根据权利要求1所述的一种利用油酸培养脂肪间充质干细胞的方法，其特征在于：步骤S5中，所述成脂诱导剂的成分为10ng/mL胰岛素、1nmol/L地塞米松、0.25mmol/LIBMX、0.2mmol/L吲哚美辛；所述培养液所含成分为DMEM、3％FBS、0.1％PS；培养4天后，所述成脂诱导剂中不再添加IBMX和吲哚美辛。