[发明专利]提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法在审
申请号: | 202310005266.4 | 申请日: | 2023-01-04 |
公开(公告)号: | CN116034943A | 公开(公告)日: | 2023-05-02 |
发明(设计)人: | 梁雅妍;黄燕华;周烁;彭杰;张续勐;王玮;高红艳;邱志勇;何丰强;王德辉;卓福球 | 申请(专利权)人: | 仲恺农业工程学院;英德德辉农业发展有限公司 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 李开成 |
地址: | 510230 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提早 分泌 分子 辅助 选育 方法 | ||
1.提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法,其特征在于,包括:
1)选择胸圆如球、尾短而上翘、阔胸平头、羽毛紧密且毛色均一、体重≥800g、颈部短而粗壮、产蛋率高、受精率高的种鸽作为基础育种群,利用基础育种群进行连续繁育,获得F1代;
2)F1代配对,孵育的乳鸽25日龄时,淘汰体重低于平均体重10%的个体,留种的乳鸽个体佩戴个体标识环,转入青年鸽舍作为后备种鸽饲养,获得F2代;
3)第一轮筛选时,F2代种鸽产蛋后将鸽蛋取出进行人工孵化,并使种鸽孵化引蛋,就巢第15天,取静脉血,然后使引蛋内部发出滚动声,第16天使引蛋内部发出滚动声和啄壳声音,第17天取种鸽静脉血,检测第15、第17天静脉血中催乳素的含量,并计算静脉血中第17天催乳素含量相对第15天催乳素含量的相对增长量;提取第15天静脉血的总DNA,进行实时荧光定量PCR反应,计算出F2代催乳素基因的平均相对拷贝数,淘汰催乳素含量相对增长量低于平均相对增长量5%的种鸽以及第17天鸽乳产生质量差的种鸽,未淘汰种鸽对应的鸽蛋人工孵化后由保姆鸽哺育长大,并作为种鸽以作为下一轮筛选,第二轮筛选时,重复第一轮筛选时的筛选步骤,经过N轮的筛选以使催乳素的表达相对稳定;在末轮筛选时,检测并计算出静脉血中催乳素基因的相对拷贝数,选择末轮筛选时催乳素基因相对拷贝数高于第一轮筛选时的平均相对拷贝数3%以上的种鸽作为F3代;
4)F3代在进行下轮选育时,引蛋内部发出滚动声时间提前一天,采血时间相应提前一天,重复步骤3)以筛选出F4代,如此重复以筛选出能够提前分泌鸽乳的种鸽。
2.根据权利要求1所述的提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法,其特征在于,实时荧光定量PCR的目标基因引物对P1为:
上游引物F1:tcctggaacgatcccctgat;
下游引物R1:tctgcagctggctgagaagatt;
参照基因引物对P2为:
上游引物F2:tccttcgtctggatctggctgg;
下游引物R2:ctctctcggctgtggtggtgaa。
3.根据权利要求2所述的提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法,其特征在于,实时荧光定量PCR的反应体系为:2uL 10ng/uL的DNA模板,10uL 2×荧光定量PCR缓冲液,上游引物和下游引物各0.5uL,7μL ddH2O。
4.根据权利要求2所述的提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法,其特征在于,实时荧光定量PCR的反应程序为:95℃预变性5min;95℃变性30s,60℃退火35s,72℃延伸40s,40个循环;72℃延伸10min;20℃保存。
5.根据权利要求1所述的提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法,其特征在于,所述引蛋包括:
壳体件,其为椭圆体状结构,所述壳体件由硬质材料制成;
滚动体,其设置在所述壳体件的内部,所述滚动体的横截面为圆形,所述滚动体与所述壳体件的内壁抵接;
驱动结构,其通过连接件固定在所述壳体件的内部,所述驱动结构用于驱动所述滚动体转动;
控制器,其与所述驱动结构连接以控制驱动结构的启停,所述控制器通过无线传输装置与外界控制系统信号连接;
蓄电池,其与所述驱动结构、控制器、无线传输装置电性连接以为驱动结构、控制器、无线传输装置提供电源。
6.根据权利要求5所述的提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法,其特征在于,所述壳体件的内壁设置有弹性塑料膜,所述滚动体的弧形面抵接在所述弹性塑料膜上。
7.根据权利要求6所述的提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法,其特征在于,所述驱动结构为步进电机,所述步进电机的输出轴与所述滚动体连接以驱动所述滚动体在壳体件中转动。
8.根据权利要求7所述的提早分泌鸽乳的种鸽分子辅助选育方法,其特征在于,所述步进电机的输出轴上设置有第一单向转动轴承,所述滚动体与所述第一单向转动轴承固定连接。
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