[发明专利]一种生产1α-羟基去氢表雄酮的生物转化培养基及生产方法

权利要求书

1.一种生产lα-羟基去氢表雄酮的生物转化培养基，包括氮源、碳源、无机盐、微量元素和1,3-二氮唑；按照质量份数计，所述生物转化培养基包括如下组分：氮源0.2～5.0份，碳源1.0～5.0份，无机盐0.4～4.0份，1,3-二氮唑0.05～0.4份；

所述氮源选自蛋白胨、黄豆粉、花生粉、玉米浆和酵母膏中的一种或多种；所述碳源选自葡萄糖、麦芽糖、淀粉、糊精和蔗糖中的一种或多种；所述无机盐选自磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、硫酸镁、硫酸钠和硫酸钾中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的生物转化培养基，其特征在于，所述生物转化培养基包括蛋白胨、葡萄糖、糊精、氯化钠、磷酸二氢钾、硫酸镁和1,3-二氮唑；按照质量份数计，包括蛋白胨0.2～5.0份，葡萄糖0.5～2.5份，糊精0.5～2.5份，氯化钠0.2～2.0份，磷酸二氢钾0.1～1.0份，硫酸镁0.1～1.0份，1,3-二氮唑0.05～0.4份。

3.根据权利要求2所述的生物转化培养基，其特征在于，所述生物转化培养基包括如下组分：蛋白胨0.2～1.0份，葡萄糖0.5～1.0份，糊精0.5～1.0份，氯化钠0.2～0.6份，磷酸二氢钾0.1～0.3份，硫酸镁0.1～0.3份，1,3-二氮唑0.05～0.2份。

4.根据权利要求3所述的生物转化培养基，其特征在于，所述生物转化培养基包括如下组分：蛋白胨0.5份，葡萄糖0.8份，糊精0.3份，氯化钠0.2份，磷酸二氢钾0.2份，硫酸镁0.2份，1,3-二氮唑0.2份。

5.根据权利要求1所述的生物转化培养基，其特征在于，所述生物转化培养基还包括水，各组分浓度为：氮源0.2～5.0g/100mL，碳源1.0～5.0g/100mL，无机盐0.4～4.0g/100mL，1,3-二氮唑0.05～0.4g/100mL，所述生物转化培养基的pH值为6.0～6.5。

6.根据权利要求5所述的生物转化培养基，其特征在于，各组分浓度为：蛋白胨0.2～5.0g/100mL，葡萄糖0.5～2.5g/100mL，糊精0.5～2.5g/100mL，氯化钠0.2～2.0g/100mL，磷酸二氢钾0.1～1.0g/100mL，硫酸镁0.1～1.0g/100mL，1,3-二氮唑0.05～0.4g/100mL。

7.根据权利要求6所述的生物转化培养基，其特征在于，各组分浓度为：蛋白胨0.2～1.0g/100mL，葡萄糖0.5～1.0g/100mL，糊精0.5～1.0g/100mL，氯化钠0.2～0.6g/100mL，磷酸二氢钾0.1～0.3g/100mL，硫酸镁0.1～0.3g/100mL，1,3-二氮唑0.05～0.2g/100mL。

8.根据权利要求7所述的生物转化培养基，其特征在于，各组分浓度为：蛋白胨0.5g/l00mL，葡萄糖0.8g/100mL，糊精0.3g/l00mL，氯化钠0.2g/100mL，磷酸二氢钾0.2g/l00mL，硫酸镁0.2g/l00mL，1,3-二氮唑0.2g/l00mL，所述生物转化培养基的pH值为6.5。

9.一种生产lα-羟基去氢表雄酮的方法，包括如下步骤：

(1)将草酸青霉Penicillium oxalicum IFO-7000菌株接入到种子培养基，培养得到种子培养液；

(2)将种子培养液接入所述生物转化培养基中培养，向所得生物转化液中补入底物去氢表雄酮，继续培养；

(3)从生物转化液中分离出lα-羟基去氢表雄酮；

其中，步骤(1)中种子培养的温度为25～28℃，培养1～3天，摇床培养时摇瓶转速100～300r/min；步骤(2)中种子培养液接种量为2％～10％(v/v)，去氢表雄酮的添加量为2～5mg/mL，补入时间为种子培养液接入后1～3天，继续培养的时间为2～4天；步骤(2)所述的生物转化过程的培养温度为25～28℃。

10.根据权利要求9所述的生产方法，其特征在于，步骤(1)中所述的种子培养基为权利要求1-8任一所述的生物转化培养基；步骤(1)中种子培养的温度为26℃，培养2天，摇床培养时摇瓶转速220r/min；步骤(2)中种子培养液接种量为4％～6％(v/v)；步骤(2)中去氢表雄酮的添加量为3mg/mL，补入时间为种子培养液接入后2天，继续培养的时间为3天；步骤(2)所述的生物转化过程的培养温度为26℃。