[发明专利]膀胱癌的实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒及其专用引物和探针

权利要求书

1.一种膀胱癌的实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括基于实时荧光核酸恒温扩增方法的分别特异性检测以下检测基因的试剂：CDC2、MDK、IGF2、UPK1B和TERT；

所述试剂盒还包括基于实时荧光核酸恒温扩增方法的特异性检测GAPDH、PKG1、PPIA、UBC或ABL1的试剂，所述GAPDH、PKG1、PPIA、UBC或ABL1作为检测内参基因。

2.根据权利要求1所述的膀胱癌的实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括基于实时荧光核酸恒温扩增方法的分别特异性检测以下检测基因的试剂：HOXA13、IGFBP5、CXCR2、CRH和IANXA10。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，针对每一种基因(包括检测基因和检测内参基因)的特异性检测试剂包括与该种基因对应的：

(1)核酸提取液：其包含含有特异性捕获探针的固相支持物和第一引物，其中所述特异性捕获探针用于捕获基因序列，所述第一引物用于与基因序列中的靶标序列特异性结合；

(2)检测液a：其包含第二引物，所述第二引物与所述第一引物配合，用于扩增靶标序列；

(3)检测液b：其包含第一引物和靶标检测探针，其中所述靶标检测探针与靶标序列的扩增产物RNA拷贝特异性结合；

任选的，试剂盒中还包括：

(4)SAT酶液：其包含至少一种RNA聚合酶和M-MLV反转录酶。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，

特异性检测以下基因的特异性捕获探针的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1-SEQ IDNO:15所示：CDC2、HOXA13、MDK、IGFBP5、CXCR2、CRH、IGF2、UPK1B、ANXA10、TERT、GAPDH、PKG1、PPIA、UBC和ABL1；

特异性检测以下基因的第一引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:16-SEQ ID NO:30所示：CDC2、HOXA13、MDK、IGFBP5、CXCR2、CRH、IGF2、UPK1B、ANXA10、TERT、GAPDH、PKG1、PPIA、UBC和ABL1；

特异性检测以下基因的第二引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:31-SEQ ID NO:45所示：CDC2、HOXA13、MDK、IGFBP5、CXCR2、CRH、IGF2、UPK1B、ANXA10、TERT、GAPDH、PKG1、PPIA、UBC和ABL1；

特异性检测以下基因的靶标检测探针的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:46-SEQ ID NO:60所示：CDC2、HOXA13、MDK、IGFBP5、CXCR2、CRH、IGF2、UPK1B、ANXA10、TERT、GAPDH、PKG1、PPIA、UBC和ABL1，在所述靶标检测探针的核苷酸序列两端分别携带有荧光报告基团和淬灭基团。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括外源内标，其核苷酸序列如SEQ ID NO:91所示；

可选地，所述试剂盒还包括特异性检测所述外源内标的内标捕获探针、第一内标引物、第二内标引物和内标检测探针，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:92-SEQ ID NO:95所示，且在所述内标检测探针的核苷酸序列两端分别携带有荧光报告基团和淬灭基团。