[发明专利]一种限制性感染冠状病毒的动物模型的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种构建限制性感染冠状病毒的动物模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：构建组成型表达人ACE2和条件性表达冠状病毒衣壳蛋白的动物品系；

S2：将诱导物导入所述组成型表达人ACE2和条件性表达冠状病毒衣壳蛋白的动物品系的指定组织中，得到在指定组织中表达所述冠状病毒衣壳蛋白的动物品系；

S3：使用敲除了所述冠状病毒衣壳蛋白编码序列的缺陷型冠状病毒基因组包装的病毒颗粒感染所述在指定组织中表达冠状病毒衣壳蛋白的动物品系，得到所述限制性感染冠状病毒的动物模型。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1中，将人ACE2表达框和冠状病毒衣壳蛋白表达框转入到动物体内，并且所述人ACE2表达框为组成型表达，所述冠状病毒衣壳蛋白表达框为诱导表达，得到所述组成型表达人ACE2和条件性表达冠状病毒衣壳蛋白的动物品系。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述冠状病毒为SARS-CoV-2或其他通过ACE2感染细胞的病毒。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述人ACE2表达框包括启动子和紧邻其下游的人ACE2编码框，所述人ACE2编码框编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述冠状病毒衣壳蛋白表达框包括冠状病毒衣壳蛋白编码框和控制所述状病毒衣壳蛋白编码框启动转录的启动子，并且控制所述状病毒衣壳蛋白编码框启动转录的启动子与所述状病毒衣壳蛋白编码框之间设置有阻断转录的间隔序列，所述间隔序列为可诱导切除的间隔序列。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述间隔序列的两端分别设置一个LoxP位点，两个LoxP位点的序列方向相同，

S2中，通过所述组成型表达人ACE2和条件性表达冠状病毒衣壳蛋白的动物品系与在指定组织中诱导表达Cre-重组酶的动物品系杂交，得到所述在指定组织中表达所述冠状病毒衣壳蛋白的动物模型，所述人ACE2表达框和冠状病毒衣壳蛋白表达框方向相反。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述冠状病毒衣壳蛋白编码框编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，所述动物模型为小鼠模型。

9.权利要求1-8中任一项所述的方法构建的动物模型在开发或评价冠状病毒防治药物中的应用。

10.权利要求1-8中任一项所述的方法构建的动物模型在研究冠状病毒对指定组织中的影响中的应用。