[发明专利]安宫牛黄丸的指纹图谱检测方法及其指纹图谱

说明书

本发明涉及中药检测的技术领域，尤其是涉及一种安宫牛黄丸的指纹图谱检测方法及其指纹图谱；一种安宫牛黄丸的指纹图谱检测方法，步骤如下：供试品溶液的制备：称取安宫牛黄丸，粉碎，加入硅藻土进行混合，再进行微波干燥、冷冻处理后，加入甲醇溶液进行超声提取，过滤，得到供试品溶液；对照品溶液的制备：分别称取麝香、冰片、郁金、栀子、黄芩、黄连、牛黄，加入甲醇溶液溶解，得到对照品溶液；高效液相色谱法测定安宫牛黄丸的指纹图谱；本申请通过采用高效液相色谱法，并对色谱条件进行合理控制，使本申请获得的指纹图谱能够对安宫牛黄丸进行更全面的质量评价，检测方法简便快速、准确性高、重复性好，稳定性好，耐用性好。

技术领域

本发明涉及中药检测的技术领域，尤其是涉及一种安宫牛黄丸的指纹图谱检测方法及其指纹图谱。

背景技术

安宫牛黄丸是由牛黄、水牛角浓缩粉、麝香、郁金、黄连、黄芩和栀子等中药制成的复方制剂，用于主治清热解毒，镇惊开窍，用于治疗热病，邪入心包，高热惊厥，神昏谵语及中风昏迷等症。现代药理研究表明安宫牛黄丸具有解热、镇痛、抗炎消肿、抗病毒、抗惊厥、复苏和保肝等作用。临床应用发现安宫牛黄丸还可用于各种急性期高热、昏迷；难治性癫痫、小儿惊厥；重症肝炎、肝功能异常等病症。

安宫牛黄丸作为《中国药典》2020年版收录品种，其质量控制主要是对牛黄、黄连、黄芩、冰片、麝香进行薄层鉴别；现有技术中质量控制研究主要是对安宫牛黄丸中2-3个成分进行的含量测定，只关注了安宫牛黄丸中的某几个成分，无法充分反应制剂的整体质量。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供了一种安宫牛黄丸的指纹图谱检测方法及其指纹图谱。

第一方面，本申请提供一种安宫牛黄丸的指纹图谱检测方法，采用如下的技术方案：一种安宫牛黄丸的指纹图谱检测方法，步骤如下：

(1)供试品溶液的制备：

取安宫牛黄丸，精密称定，剪碎，加硅藻土分散混合后，进行微波干燥、冷冻处理；将冷冻处理后的混合物研匀，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇，称定重量，超声提取，放冷后称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

其中，微波干燥的步骤如下：将混合物在波长1mm-1m，频率500MHz-1200MHz，真空度为-0.08Mpa下进行干燥15-20min。

冷冻处理的步骤如下：将微波干燥后的混合物在-10℃～-20℃下进行冷冻1-5min。

(2)对照品溶液的制备：

分别称取人工麝香、冰片、郁金、栀子、黄芩、黄连、牛黄，加入甲醇溶液溶解，得到对照品溶液；

(3)高效液相色谱法测定安宫牛黄丸的指纹图谱：

将供试品溶液和对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，测定指纹图谱。

所得图谱经软件计算与标准指纹图谱的相似度不得低于90％。

通过采用上述技术方案，通过对安宫牛黄丸进行微波干燥，使物料本身被加热，物料中水分能强烈地吸收微波，从而可以蒸发掉安宫牛黄丸中的部分水分，对微波干燥后的安宫牛黄丸进行冷冻处理，干燥后的物料迅速降温后变硬，从而可以降低安宫牛黄丸的黏度，有效防物料因黏度过大而对产品的检测产生一定的影响，保证了检测结果的准确性。

优选的，步骤(3)中色谱条件如下：色谱柱：C18；流动相A：乙腈；流动相B：体积浓度为0.1％-0.5％的磷酸水溶液；柱温：25-35℃；流动相流速为0.5-1.2mL/min；进样体积为5-15μl；检测波长为200-260nm。

优选的，色谱柱为Agilent TC-C18(250mm×4.6mm，5μm)。

优选的，流动相B磷酸水溶液的体积浓度为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、或0.5％；进一步的，流动相B磷酸水溶液的体积浓度为0.1％。