[发明专利]含七叶皂苷和/或其盐化合物的转染复合物在促转染的应用

说明书

本发明提供包含七叶皂苷和/或七叶皂苷盐化合物的转染复合物，该复合物用于递送核酸能够提高转染效率，所递送的核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和/或核糖核酸(RNA)。本发明进一步将七叶皂苷和/或七叶皂苷盐化合物和其他非病毒载体组合使用的转染复合物用于转染。本发明首次发现七叶皂苷和/或七叶皂苷盐化合物在转染中可以有效提高载体的转染能力，可用于核酸药物中。

技术领域

本发明涉及基因递送和/或核酸药物领域，尤其涉及一种含有七叶皂苷和/或七叶皂苷盐化合物的转染复合物，所述转染复合物包括非病毒载体和/或核酸分子，所述非病毒载体包括脂质体、脂质纳米颗粒、纳米乳、天然聚合物、合成聚合物的一种或多种，同时涉及转染复合物的制备方法和作为核酸药物载体/药物的应用，并可用于核酸药物治疗或预防癌症、病毒感染和遗传疾病等人类疾病。

背景技术

随着医疗行业的发展，基因治疗也逐渐展露锋芒。基因治疗是指将正常的外源基因导入靶细胞，补救基因缺陷或者异常所导致的疾病，从而达到治疗目的。核酸根据化学组成不同主要分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。核酸药物为治疗或预防癌症、病毒感染和遗传疾病等人类疾病提供了新的治疗方式。目前，核酸药物主要包括质粒DNA，ASON，mRNA，siRNA，miRNA，RNA aptamer，saRNA，SAM，sgRNA，snRNA和其他基因治疗药物等。

近年来，核酸的递送和核酸药物取得了长足的发展。然而，核酸药物的发展也面临着巨大的挑战。核酸药物作为带负电的生物活性大分子，其体内递送存在诸多障碍。核酸药物入血后，极易被血液中的核酸酶清除，因此导致其具有半衰期短、生物利用度低等缺点。所以，一个高效低毒的递送载体对于核酸药物的应用来说显得至关重要。

目前为止，已有多款核酸药物被批准上市，如三种基于非病毒载体脂质纳米颗粒的RNA药物，包括用于治疗遗传性甲状腺素介导的淀粉样变性的多发性神经病RNAi药物Patisiran(商品名：)，用于COVID-19预防的mRNA疫苗Tozinameran(商品名：Comirnaty)和Elasomeran(商品名：Spikevax)；另有利用无针注射器按压于皮肤给药的ZyCoV-D疫苗，其属于DNA药物。

对于核酸递送，常用的载体通常为脂质纳米颗粒，由于脂质纳米颗粒存在巨大的专利壁垒，从而限制了核酸药物的发展。

因此，需要开发转染效率更高的递送载体构建核酸药物平台。

发明内容

为了解决现有的基因递送载体转染效率低，专利壁垒多的问题。本发明通过创造性的研究发现，七叶皂苷和/或其盐化合物可明显提高非病毒载体的转染效率。本发明的目的之一是提供七叶皂苷和/或七叶皂苷盐化合物在基因递送中的应用。

为了实现上述目的，本发明的发明人进行了大量的研究，评价了不同非病毒载体与七叶皂苷和/或七叶皂苷盐化合物组合使用对不同类型核酸转染的影响，结果发现七叶皂苷和/或七叶皂苷盐化合物均能提高不同非病毒载体的转染效果，可以应用于核酸的体内外递送，并可以进一步发展成为核酸药物。

本发明的目的之一是提供一种转染复合物，其包含七叶皂苷和/或七叶皂苷盐化合物，同时还包含非病毒载体和/或核酸分子。所述核酸分子是核酸药物，进一步优选为DNA和/或RNA。进一步地，所述核酸药物包括质粒DNA(plasmid DNA，pDNA)、反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide，ASON)、编码治疗性蛋白或疫苗抗原基因的信使RNA(mRNA)、含有核苷酸修饰的mRNA、小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)、微小RNA(microRNA，miRNA)、调控蛋白活性的RNA适配体(RNA aptamer)、小激活RNA(saRNA)、环状RNA、自扩增mRNA(SAM)、小向导RNA(sgRNA)、U1小核RNA(snRNA)和其他基因治疗药物的一种或多种。所述RNA分子包括含有或不含核苷酸修饰的mRNA、siRNA、miRNA、saRNA、环状RNA、SAM、sgRNA、U1 snRNA和其他基因治疗药物的一种或多种。