[发明专利]一种活细胞规模培养成像方法

说明书

本发明公开了一种活细胞规模培养成像方法，涉及活细胞体外培养技术领域。包括如下步骤：S1：向培养箱内放入若干活细胞，并关闭培养箱箱门；S2：将活细胞在培养箱内培养3~7天，并定期观察处于培养发育的活细胞；对活细胞观察成像的步骤包括：S21：在培养箱外控制培养箱内的观察装置移动到培养箱内的观察区域；S22：对应在培养箱外控制目标活细胞移动至所述观察装置的观察区；S23：通过观察装置对所述目标活细胞观测成像。本发明提供了一种活细胞规模培养成像方法，实现活细胞规模化培养，并避免了箱外活细胞成像操作，提高了活细胞存活率。

技术领域

本发明涉及活细胞体外培养技术领域，尤其涉及一种活细胞规模培养成像方法。

背景技术

辅助生殖体外受精是指哺乳动物的精子和卵子在体外环境下完成受精过程的技术。受精完成后，受精卵还需要在培养箱内体外培养3-7天，完成移植、冷冻等操作后结束整个体外受精的过程。

现有的哺乳动物及人类胚胎的体外培养，是通过将装有受精卵或胚胎的培养皿放置于常规的二氧化碳培养箱、三气培养箱或时差培养箱中进行培养，同时保证培养环境的温度、湿度及洁净度所实现的。

而在现有技术中，如果使用常规的二氧化碳培养箱及三气培养箱，就需要在受精卵或胚胎体外培养的各个特定阶段，由技术人员将装有受精卵或胚胎的培养皿从培养箱内拿出，放在倒置显微镜下进行人工观察。在观察的过程中，受精卵或胚胎脱离稳定的箱内培养环境，会受到温度、气体浓度的剧烈变化影响，影响胚胎的发育潜能。而且，培养箱内布置有多个容置有活细胞的培养皿，多个培养皿占据培养箱内大量空间后反而会导致箱内可操作空间狭小，技术人员单靠肉眼识别找到并取出目标培养皿的操作流程出错率较高且十分不便，导致目标培养皿不能被快速取出，活细胞成像观察效率低。

发明内容

本发明提供了一种活细胞规模培养成像方法，使活细胞在独立培养舱中保持正常发育的同时，还可控制显微成像装置自动对规模化培养箱中的各个独立培养舱中的活细胞进行成像观察操作，用以解决上述技术问题。

本发明解决上述问题的技术方案是：提供一种活细胞规模培养成像方法，包括如下步骤：

S1：向培养箱内放入若干活细胞，并关闭培养箱箱门；

S2：将活细胞在培养箱内培养3~7天，并定期观察处于培养发育的活细胞；对活细胞观察成像的步骤包括：S21：在培养箱外控制培养箱内的观察装置移动到培养箱内的观察区域；S22：对应在培养箱外控制目标活细胞移动至所述观察装置的观察区；S23：通过观察装置对所述目标活细胞观测成像。

进一步地，在步骤S1，向培养箱内放入若干活细胞的过程为：将若干活细胞放置到若干承载平台上，回收所有承载平台至培养箱内的培养区域。

进一步地，实施步骤S2之前，以观察装置的初始位置为中心，建立空间坐标系；然后根据建立的空间坐标系预先确定目标活细胞在观察区域时的三维坐标，根据目标活细胞的三维坐标来对应控制观察装置移动。

进一步地，在步骤S2中，观察装置在培养箱内的移动为三轴移动。

进一步地，在步骤S2中，通过控制承载平台移动以带动活细胞移动，且每个承载平台在培养箱内的移动均为水平移动，每个承载平台的移动路线都经过所述观察区域。

进一步地，在步骤S22中，观察装置初始设置在观察区域的下方，观察装置移动到观察区域的路线为Z轴直线移动。

进一步地，在步骤S22中，在培养箱外控制目标活细胞移动至观察装置的观察区时，除目标活细胞所在的承载平台之外，其他的承载平台均被限制在培养箱内的培养区域内。

进一步地，实施步骤S23之前，观察装置先扫描识别移动到所述观察区域的活细胞，以判断当前处在观察区的活细胞是否为目标活细胞。