[发明专利]一种生物膜的制备方法及其应用在审
申请号: | 202310050730.1 | 申请日: | 2023-02-01 |
公开(公告)号: | CN116121233A | 公开(公告)日: | 2023-05-16 |
发明(设计)人: | 王亭中;赵宗传;张光明;何海滨 | 申请(专利权)人: | 深圳市百穗康实业有限公司 |
主分类号: | C12N11/12 | 分类号: | C12N11/12;C12N1/20;C02F3/10;C02F3/34;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/25;C12R1/46;C12R1/01 |
代理公司: | 深圳市中科创为专利代理有限公司 44384 | 代理人: | 尹益群 |
地址: | 518000 广东省深圳市宝安*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物膜 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种生物膜的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:制备纤维素载体;用纤维素载体对微生物进行负载;制备包覆剂;用包覆剂对负载菌种的载体进行包覆。
2.如权利要求1所述的生物膜的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1将纤维素分散于氢氧化钠、尿素、水组成的混合液中搅拌得到悬浮液,冷冻后升华得到纤维素气凝胶;
S2将沸石粉酸化处理后与纤维素气凝胶、乙醇溶液混合,经超声反应后过滤、干燥得到纤维素载体;
S3将COD降解菌培养并制成菌悬液后与纤维素载体混合,经浓缩、自然风干后得到负载菌种的载体物;
S4用聚乙二醇、普鲁兰多糖反应制得包覆剂;
S5将包覆剂、负载菌种的载体混合后加至氯化钙水溶液中反应过滤,洗涤,得到生物膜。
3.如权利要求2所述的生物膜的制备方法,其特征在于,所述纤维素气凝胶为改性纤维素气凝胶,其制备方法如下:
M1将纤维素分散于氢氧化钠、尿素、水组成的混合液中搅拌得到悬浮液,冷冻后升华得到纤维素气凝胶;
M2向悬浮液中加入双(3-三甲氧基硅基丙基)胺搅拌,冷冻后升华得到改性纤维素气凝胶。
4.如权利要求1或2所述的生物膜的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1将微晶纤维素分散于由氢氧化钠、尿素、水组成的混合液中,在室温下搅拌2-3h得到悬浮液;
S2向S1步骤得到的悬浮液中以1-2滴/秒的速度滴加双(3-三甲氧基硅基丙基)胺,滴加完成后,室温下搅拌10-20min,静置2-3h后转移至模具中,并在液氮浴中冷冻,然后在10-40℃下进行真空升华,得到改性纤维素气凝胶;
S3将沸石粉加入到30-36wt%盐酸中搅拌2-3h,过滤、滤饼用水洗涤至滤液pH为中性后在60-80℃干燥8-10h得到酸化沸石,将酸化沸石、S2步骤得到的改性纤维素气凝胶、75-95wt%乙醇水溶液混合,在60-100Hz、120-150W条件下超声处理1-2h后过滤,将滤饼置于60-80℃下干燥6-8h得到改性纤维素载体;
S4将COD降解菌分别进行培养后,离心收集菌体,混合得到菌悬液,然后将改性纤维素载体与菌悬液混合均匀,在20-40℃下浓缩至固含量≥80%,室温下自然风干,得到负载菌种的载体物;
S5将聚乙二醇、普鲁兰多糖、水混合,加热至50-70℃,搅拌20-30min后,冷却至40-50℃,得到包覆剂;
S6将包覆剂、负载菌种的载体物混合均匀后,加至1-2mol/L氯化钙水溶液中,反应20-24h后,过滤,滤饼用水洗涤2-3次,得到生物膜。
5.如权利要求4所述的生物膜的制备方法,其特征在于:所述S1步骤中氢氧化钠、尿素、水的质量比为5-8:10-15:50-100。
6.如权利要求4所述的生物膜的制备方法,其特征在于:所述S2步骤中悬浮液与双(3-三甲氧基硅基丙基)胺的质量比为5-10:1。
7.如权利要求4所述的生物膜的制备方法,其特征在于:所述S3步骤中沸石粉与盐酸的质量比为1:10-15;酸化沸石、改性纤维素气凝胶、乙醇水溶液的用量比为5-10g:1g:100-200mL。
8.如权利要求4所述的生物膜的制备方法,其特征在于:所述S3步骤中的COD降解菌的培养步骤如下:将枯菌草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪肠球菌、疏水戈登氏菌按2-5wt%的接种量分别接种于LB液体培养基中与于25-30℃进行震荡培养15-20h,通过发酵罐于25-30℃下无氧发酵25-30h,培养后的活菌数均不少于108CFU/g,然后收集各个菌种的菌液;然后按照质量比为1-2:1-2:1:1:1-2将枯草芽孢杆菌液、解淀粉芽孢杆菌液、植物乳杆菌液、粪肠球菌液、疏水戈登氏菌菌液混合。
9.一种生物膜,其特征在于:由权利要求1-8任一项所述的生物膜制备方法制备而成。
10.如权利要求9所述的生物膜的应用,其特征在于:将其应用于生物膜反应器用于污水处理。
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