[发明专利]白刺花多糖在制备抗肿瘤药物中的应用及提取方法

说明书

本发明公开了一种超声酶解法提取白刺花多糖的方法，属于中药有效成分提取的技术领域。本发明意在提供了水提醇沉法提取白刺花多糖的优化工艺。本发明以提取时间、提取温度、液料比为影响因素设计Box‑Behnken响应面试验，确定优化提取条件为液料比10mL/g；超声提取时间67min；提取温度为42℃。该提取工艺所得白刺花多糖在体外对肝癌细胞SMMC‑7721、HepG2增殖有良好的抑制活性。

技术领域

本发明属于中药有效成分提取的技术领域，涉及到白刺花多糖的的制备方法及应用。

背景技术

白刺花(Sophora davidii)为豆科槐属植物，以根、茎、叶以及花入药，是我国少数民族常用药物之一，多生长于山坡路旁灌木丛中或草坡，在我国云南、贵州、四川等多省均有广泛分布。白刺花味苦，性凉，功能主治清热解毒，利湿消肿；全草含生物碱、黄酮苷、氨基酸、多糖等活性成分。

癌症作为困扰全球的疾病，目前患病人数仍处于逐年上升趋势，其高病死率严重影响人类生命健康安全。近年来，中药活性成分在癌症的治疗领域备受关注，开发新的抗癌天然药物成为研究热点。相比于目前常用的抗癌方式，例如手术、放疗以及化疗，中药活性成分在兼顾有效性及生物利用度的同时，可减少患者治疗过程的不适。目前中药活性成分已被广泛认可接受，成为癌症治疗手段之一。

目前研究表明，白刺花活性成分除了具有良好的血糖调控、抗炎作用外，在抗氧化活性与免疫调节等方面也表现出较好的活性。本发明提供一种白刺花多糖的提取方法及其在抗肝癌领域的应用，为该领域进一步研究提供参考。

发明内容

本发明的一个目的在于，提供一种超声酶解法提取白刺花多糖的方法，并提供了白刺花多糖新的应用方向。

为了实现本发明目的，具体采用如下技术手段：

白刺花多糖提取方法如下：

(1)粉碎：取白刺花适量置于中药粉碎机中，粉碎过筛得到白刺花粗粉，备用；

(2)提取：将步骤(1)所得白刺花粗粉与纯化水混合均匀，加入1％复合酶超声提取2次，过滤，合并两次滤液得白刺花粗提液；

(3)浓缩：将步骤(2)所得白刺花多糖粗提液经减压浓缩至黏稠，得白刺花多糖浓缩液备用；

(4)醇沉：上述步骤(3)所得浓缩液放冷后加入乙醇溶液搅拌均匀，置离心机中分离上清液与下层沉淀物；取离心一次后的上层清液重复该步骤，收取两次沉淀物，并将离心所得上清液回收处理；

(5)精制：将步骤(4)所得沉淀物加纯化水搅拌溶解，得白刺花多糖溶解液；重复步骤(4)对复溶的白刺花多糖溶解液二次醇沉；

(6)干燥：将步骤(5)所得全部醇沉物转移至蒸发皿中，置烘箱中干燥至恒重即得白刺花多糖。

优选的，所述步骤(1)白刺花粉碎至粗粉粒径为15～80目。

优选的，所述步骤(2)白刺花粗粉与水的液料比为5～15mL/g；超声提取时间为30～90min；超声功率为300～500W；提取温度为20～70℃。所述复合酶为纤维素酶、淀粉酶、果胶酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶中的一种或几种。

优选的，所述步骤(3)减压浓缩过程真空度控制在-0.07～-0.1Mpa；旋蒸水浴温度为40～60℃；浓缩至加入水体积的1/5～1/15。

优选的，所述步骤(4)乙醇浓度为60％～95％，加入乙醇体积为浓缩液体积的3～5倍，离心转速在4500～5500r/min。

优选的，所述步骤(6)干燥温度为40～60℃；干燥时间为20～60min。

优选的，所述提取工艺得到的白刺花多糖对癌细胞增殖具有抑制作用。