[发明专利]一种偏翅唐松草多糖提取方法及其抗氧化活性分析方法

说明书

本发明提出一种偏翅唐松草多糖提取方法及其抗氧化活性分析方法，包括先准备试验所需要的材料，并对材料进行处理，之后采用热水浸提法提取偏翅唐松草多糖，再利用单因素试验和正交试验对影响偏翅唐松草多糖提取率的四个影响因素进行对比研究，并以多糖提取率为参考指标，其中四个影响因素分别为料液比、提取时间、提取温度和提取次数，继而得出最佳提取工艺，再根据最佳提取工艺进行偏翅唐松草多糖提取，之后并进行抗氧化活性分析，分析出不同浓度多糖溶液对DPPH的清除能力，为偏翅唐松草多糖的药理学活性研究提供数据支持。

技术领域

本发明涉及偏翅唐松草多糖提取技术领域，尤其涉及一种偏翅唐松草多糖提取方法及其抗氧化活性分析方法。

背景技术

偏翅唐松草是四川、云南和西藏地区的一种唐松草，毛茛科唐松草属植物，清热燥湿，降火解毒，偏翅唐松草根及根茎短细，直径约1cm，表面褐色，有一层褐色的纤维，木质的中心部分是淡黄色，味道苦涩，主要用于治疗湿热泻痢、黄疸、白带、风火牙痛、眼睛红肿等。多于春秋两季挖采，清洗其身上泥沙，除去苗和茎后入药。具有多种化学成分，各有不同功效，如多糖，具有抗病毒、抗肿瘤降血糖、降血压、调节免疫力等功效，是偏翅唐松草的重要活性物质之一。

现阶段常用的植物多糖提取方法有水提醇沉、酸碱浸提、离子交换等方法，这些方法各有优劣，如酶辅助法提取条件温和，可明显提高植物成分的提取效率，但成本较高，微波辅助法能够提升释放多糖的速度，但超声作用时间过长会导致多糖的降分解，影响提取效率，因此本发明提出一种偏翅唐松草多糖提取方法及其抗氧化活性分析方法以解决现有技术中存在的问题。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的在于提出一种偏翅唐松草多糖提取方法及其抗氧化活性分析方法，该种偏翅唐松草多糖提取方法及其抗氧化活性分析方法具有成本低、制备效率高的优点，解决现有技术中存在的问题。

为实现本发明的目的，本发明通过以下技术方案实现：一种偏翅唐松草多糖提取方法及其抗氧化活性分析方法，包括以下步骤：

步骤一：将采集的偏翅唐松草进行风干，再通过粉碎机对风干后的偏翅唐松草进行粉碎，制得偏翅唐松草粉末，再准备提取实验相关的化学试剂，其中化学试剂包括葡萄糖标准品、苯酚、硫酸、无水乙醇、DPPH和甲醇；

步骤二：称取试验所需的葡萄糖标准品放入容器中，加入纯水并搅拌，直至完全溶解，得到葡萄糖溶液，再吸取不同容量的溶液，分别滴加于试管中，再依次滴加苯酚溶液和硫酸，之后轻微振荡混匀，制得混合溶液；

步骤三：将混合溶液通过水浴锅进行水浴，水浴后进行自然冷却，冷却后再取各试管中混合溶液置于96孔型细胞培养板，使用酶标仪测定吸光度，根据测定的吸光度以及各试管中葡萄糖不同浓度值绘制标准曲线；

步骤四：称取试验所需的偏翅唐松草粉末放入容器中，加入纯水，再利用水浴锅进行反复浸提，在多次浸提后收集浸提液并进行过滤，之后使用旋蒸仪将滤液浓缩，再加入乙醇进行混合，混合均匀后静置，待多糖沉降后，进行离心，之后再将沉降物经真空冷冻干燥后即得偏翅唐松草多糖粗提物；

步骤五：采用苯酚硫酸法进行偏翅唐松草多糖的含量测定；

步骤六：进行单因素试验，并以多糖提取率为参考指标，采用水提醇沉法研究料液比、提取时间、提取温度和提取次数四个影响因素对偏翅唐松草多糖提取率的影响，并利用正交设计试验优化偏翅唐松草多糖提取工艺。

进一步改进在于：所述步骤一中，对制得的偏翅唐松草粉末通过干燥机进行干燥。

进一步改进在于：所述步骤四中，在水浴锅内单次浸提时间为30-60min。

进一步改进在于：所述步骤六中，研究不同料液比对偏翅唐松草多糖提取率的影响步骤为：