[发明专利]一种提高玉米产量的方法在审

专利信息
申请号: 202310055807.4 申请日: 2023-01-18
公开(公告)号: CN116254293A 公开(公告)日: 2023-06-13
发明(设计)人: 郑挺;沈志成 申请(专利权)人: 杭州瑞丰生物科技有限公司
主分类号: C12N15/84 分类号: C12N15/84;C12N15/65;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 杭州天正专利事务所有限公司 33201 代理人: 黄美娟;李世玉
地址: 311121 浙江省杭州市*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 玉米 产量 方法
【权利要求书】:

1.一种提高玉米产量的方法,其特征在于,所述方法是在玉米中过表达生长素输入载体蛋白,获得穗行数、穗粒重、或容重显著增加的转化株,提高玉米产量。

2.如权利要求1所述提高玉米产量的方法,其特征在于,所述的生长素输入载体蛋白氨基酸序列为SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6中的一种。

3.如权利要求1所述提高玉米产量的方法,其特征在于,所述过表达生长素输入载体蛋白是将生长素输入载体蛋白过表达盒转入玉米基因组中,所述生长素输入载体蛋白过表达盒是在生长素输入载体蛋白质编码基因的5’端与一个启动子功能性地连接,3’端与一个终止子功能性地连接而构成。

4.如权利要求3所述提高玉米产量的方法,其特征在于,所述生长素输入载体蛋白过表达盒包括ZmAUX1表达盒,或ZmATL1表达盒。

5.如权利要求4所述提高玉米产量的方法,其特征在于,所述ZmAUX1表达盒中ZmAUX1基因的mRNA编码序列根据SEQ ID NO:7的核酸序列人工合成,然后在5’添加SEQ ID NO:8中1bp至1775bp所示ZmAUX1基因的天然启动子,在3’添加SEQ ID NO:8中5984bp至6132bp所示ZmAUX1的天然终止子,得到5’端添加Hind III酶切位点,3’端添加Kpn I位点的ZmAUX1表达盒;所述ZmATL1表达盒中ZmATL1基因的mRNA编码序列根据NM_001370703.1的核酸序列人工合成,然后在5’添加SEQ ID NO 12的1bp至1492bp所示ZmATL1基因的天然启动子,在3’添加SEQ ID NO:12的7803bp至8189bp所示ZmATL1的天然终止子,得到5’端添加Hind III酶切位点,3’端添加Kpn I位点的ZmATL1表达盒。

6.如权利要求3所述提高玉米产量的方法,其特征在于,所述方法是将长素输入载体蛋白过表达盒与选择性标记基因表达框共同转入玉米基因组,所述选择性标记基因表达框包括草甘膦筛选标记表达盒pCMP-g10evo epsps。

7.如权利要求6所述提高玉米产量的方法,其特征在于,草甘膦筛选标记表达盒pCMP-g10evo epsps核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示。

8.如权利要求6所述提高玉米产量的方法,其特征在于,所述方法是将生长素输入载体蛋白过表达盒与在5’端添加Kpn I位点,3’端添加Xho I位点的草甘膦筛选标记表达盒pCMP-g10evo epsps通过三段酶切连接的方式插入到Hind III、Kpn I双酶切的pCAMBIA1300载体骨架中,获得的构建体通过电击法导入农杆菌LBA4404,再转化玉米,筛选获得产量提高的玉米。

9.如权利要求8所述提高玉米产量的方法,其特征在于,所述构建体将生长素输入载体蛋白编码基因下游的启动子替换为启动子p35S或者在Kpn I位点插入植物病毒增强子3xEnhancer,所述启动子p35S核苷酸序列SEQ ID NO:10;所述植物病毒增强子3xEnhancer核苷酸序列为SEQ ID NO:11。

10.如权利要求1所述提高玉米产量的方法,其特征在于,所述方法在在玉米基因组的生长素输入载体蛋白基因座处引入遗传修饰,提高玉米产量;所述基因组基因座编码SEQID NO:2-SEQ ID NO:6的氨基酸序列;所述遗传修饰包括将外源的增强子插入到基因组基因座启动子区域,或通过基因编辑的方法改变基因座启动子的核苷酸序列。

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