[发明专利]一株乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)SPL018及获取方法与应用

权利要求书

1.一株分离的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)SPL018，该菌种2022年09月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.25808，分类命名为乳酸乳球菌Lactococcus lactis SPL018。

2.根据权利要求1所述的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)SPL018的获取方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、采集安康市宁强富硒土壤种植的黄瓜、茶叶等作物的根土，抖落收集根部土壤于无菌袋中作为分离样源；

B、制备富硒土壤浸液培养基：取富硒土壤10g，加入0.2％盐酸100mL，40℃恒温混合搅拌30min后，用中速滤纸过滤收集滤出液，与900mL纯水混合，然加入蔗糖1.5％,酪蛋白1.2％,MgSO₄·7H₂O 0.06％,K₂HPO₄ 0.35％,CaCO₃0.4％,pH6.0。培养基用500mL三角瓶分装100mL，121℃灭菌32min备用；

C、待培养基灭菌后温度降低到30-40℃左右时，在超净台下按照5％的质量比加入富硒土，三角瓶置于35℃、200rpm的恒温摇床中进行富集培养48h；

D、之后取富集培养液5％重复接种培养5次代后，取样在固体富硒土壤浸液培养基平板上反复划线分离出单菌株，挑起粉红色或红色的菌株接种入上述富硒土壤浸液培养基内驯化，再将上述操作重复多次，划线接入MRS培养基培养,挑选乳白色之后纯化得到乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)菌株，命名为SPL018。

3.权利要求1所述的乳酸乳球菌SPL018在硒氧化中的应用，特征在于将乳酸乳球菌SPL018活化后按照体积比1-10％接种于含二价无机硒盐的MRS培养基中，然后通入包含氮气：二氧化碳：氧气的体积比例为8：1：1的混合气体，通气量10NL/min，进行发酵转化。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，当无机硒含量低于20mg/L时，所述乳酸乳球菌可将硒转化为有机硒；当无机硒含量在100～8000mg/L时，所述乳酸乳球菌可将硒转化为单质硒，单质硒尺寸为100～200nm。

5.如权利要求1所述乳酸乳球菌SPL018的应用，包括含有有乳酸乳球菌SPL018及载体有效成分的制剂，在稀释100-1000倍后进而通过土壤施用、叶面喷施及拌种等方式应用。