[发明专利]芹菜素在制备拮抗上皮细胞凋亡药物中的应用

说明书

本发明涉及药物制备技术领域，特别是涉及芹菜素在制备拮抗上皮细胞凋亡药物中的应用。本发明通过液相质谱技术，发现芹菜素是罗欧咳祖帕发挥抗哮喘作用的药效物质之一，采用芹菜素进行体内和体外干预小鼠慢性哮喘和人气道上皮细胞(HBE)凋亡实验。体外结果显示，芹菜素能抑制HBE的凋亡水平、下调线粒体膜电位及相关凋亡蛋白；体内结果显示，芹菜素能降低卵蛋白(OVA)致敏小鼠的气道上皮细胞凋亡、下调线粒体相关凋亡蛋白。结果表明，芹菜素可以抑制气道上皮细胞凋亡，特别是抑制线粒体介导的气道上皮细胞凋亡，进而在体内显示抗哮喘气道重构的作用。

技术领域

本发明涉及药物制备技术领域，特别是涉及芹菜素在制备拮抗上皮细胞凋亡药物中的应用。

背景技术

目前，有相当多的文献报道上皮细胞凋亡可能在哮喘患者发病及气道重塑中起到一定的作用。其发挥作用可能通过JNK、ERK和p38 MAPK三种经典途径。JNK和p38 MAPK在细胞暴露于各种物理、化学和生物应激刺激引起的应激后被明显地激活，被激活的JNK和p38MAPK在细胞生存和死亡中发挥关键作用。目前，大量的文献支持JNK和p38 MAPK介导促凋亡过程，许多Bcl-2家族蛋白在转录水平或转录后水平接受其调节。Bcl-2家族蛋白改变线粒体外膜的通透性并释放细胞色素c，这是内在凋亡途径的关键步骤之一。细胞色素c的释放诱发了caspase-9的激活，随后是caspase-3的激活，导致细胞凋亡。值得注意的是，caspase-9和随后的caspase-3的激活导致Bcl-2蛋白水解，从而促进更多细胞色素c的释放和caspase-9/3的激活，形成一个正反馈，进一步诱发细胞凋亡。

但是现有研究中无法科学的确认罗欧咳祖帕中发挥抗哮喘作用的药效物质，其抗哮喘的机制也需要深入的探索。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了芹菜素在制备拮抗上皮细胞凋亡药物中的应用。本发明发现芹菜素是罗欧咳祖帕发挥抗哮喘作用的药效物质之一，芹菜素通过MAPK(JNK、ERK和p38 MAPK)和气道上皮细胞凋亡途径发挥抗哮喘作用。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了芹菜素在制备拮抗上皮细胞凋亡药物中的应用。

优选的，所述上皮细胞凋亡包括线粒体介导的上皮细胞凋亡。

优选的，所述上皮细胞包括气道上皮细胞。

本发明提供了芹菜素在制备防治哮喘药物中的应用。

优选的，所述哮喘包括慢性哮喘。

优选的，所述慢性哮喘包括哮喘气道重构。

有益效果：

本发明提供了芹菜素在制备拮抗上皮细胞凋亡药物中的应用。本发明通过液相质谱技术，发现芹菜素是罗欧咳祖帕发挥抗哮喘作用的药效物质之一(见图17和图18)，采用芹菜素进行体内和体外干预小鼠慢性哮喘和人气道上皮细胞(HBE)凋亡实验。体外结果显示，芹菜素能抑制HBE的凋亡水平、下调线粒体膜电位及相关凋亡蛋白；体内结果显示，芹菜素能降低卵蛋白(OVA)致敏小鼠的气道上皮细胞凋亡、下调线粒体相关凋亡蛋白。结果表明，芹菜素可以抑制气道上皮细胞凋亡，特别是抑制线粒体介导的气道上皮细胞凋亡，进而在体内显示抗哮喘气道重构的作用。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1为人气道上皮细胞(HBE)凋亡的流式检测结果；

图2为不同组细胞凋亡率计算结果；

图3为活细胞工作站下观察线粒体膜电位结果；

图4为线粒体质量分析的流式分析结果；

图5为相关凋亡蛋白的检测结果；