[发明专利]全细胞生物传感器阵列及其应用在审

专利信息
申请号: 202310060984.1 申请日: 2023-01-17
公开(公告)号: CN116106543A 公开(公告)日: 2023-05-12
发明(设计)人: 邢福国;马俊宁;管乐 申请(专利权)人: 中国农业科学院农产品加工研究所
主分类号: G01N33/543 分类号: G01N33/543;G01N33/569;G01N33/531;G01N21/76;G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86;G06F18/2411;G06F18/2431;G06N5/01;G06N20/10
代理公司: 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 代理人: 史霞
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 细胞 生物 传感器 阵列 及其 应用
【权利要求书】:

1.全细胞生物传感器阵列,其特征在于,包括96孔板,所述96孔板上放置有14种全细胞生物传感器,每种全细胞生物传感器的数量为3-4个,每种全细胞生物传感器包括:

宿主细胞;

重组载体,其位于所述宿主细胞内,所述重组载体包括载体以及插入所述载体内的启动子,其中,

所述14种全细胞生物传感器内的启动子分别是recAp、dnaKp、grpEp、katGp、fabAp、yibTp、soxSp、glgSp、oxyRp、uvrAp、ompFp、spyp、pspAp和leuAp。

2.根据权利要求1所述的全细胞传感器阵列,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌。

3.根据权利要求2所述的全细胞传感器阵列,其特征在于,所述重组载体为质粒。

4.根据权利要求3所述的全细胞传感器阵列,其特征在于,所述质粒为含Photorhabdusluminescens荧光素酶操纵子luxCDABE和带有氨苄青霉素抗性的质粒pGEN-luxCDABE。

5.根据权利要求1-4任一项所述的全细胞传感器阵列的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1、获取宿主细胞与重组载体,采用转化法将所述重组载体转化进入所述宿主细胞内,获取14种全细胞传感器;

S2、将每种全细胞传感器制成海藻酸钙凝胶微球,然后放置到96孔板上,每种全细胞传感器的数量为3-4个,获得全细胞传感器阵列。

6.根据权利要求1-4所述的全细胞传感器阵列的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

Sa、将检测样品以及全细胞传感器阵列放置在密闭铝盒内,在室温条件下,无接触地监测检测样品的顶空有机挥发物;

Sb、每隔1h,用多波长酶标仪测量一次全细胞生物传感器阵列的响应数据,然后重新密闭铝盒内,继续用于顶空有机挥发物的监测分析,共连续监测6h;

Sc、重复步骤Sa-Sb至少30次,整理数据为120行×70列的数据矩阵;

Sd、用R语言的caret机器学习分析包分别使用随机森林、支持向量机线性核函数、支持向量机径向基核函数、稀疏偏最小二乘判别分析、高维数据判别分析等多种机器学习模型函数构建机器学习模型,筛选出最高准确度的模型进行特征值筛选优化,最终建立高准确度的分类模型。

7.根据权利要求1-4任意项所述的全细胞传感器阵列在检测花生前期霉变中的应用。

8.根据权利要求1-4任意项所述的全细胞传感器阵列在检测玉米前期霉变中的应用。

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