[发明专利]一种靶向ALK融合蛋白的放射性多肽68Ga-DOTA-PG01及其制备方法与应用

说明书

本发明提供的靶向ALK融合蛋白的放射性多肽supgt;68/supgt;Ga‑DOTA‑PG01及其制备方法与应用，涉及生物医学领域；放射性多肽supgt;68/supgt;Ga‑DOTA‑PG01制备时，先通过生物偶联技术将环状多肽PG01N端的氨基与偶联剂DOTA‑NHS进行缩合反应，得到多肽偶联物DOTA‑PG01，多肽偶联物DOTA‑PG01中的螯合剂DOTA与supgt;68/supgt;Ga螯合，构建靶向ALK融合蛋白的放射性多肽supgt;68/supgt;Ga‑DOTA‑PG01；本发明首次合成了靶向ALK融合蛋白的多肽DOTA‑PG01，通过supgt;68/supgt;Ga标记构建了靶向ALK融合蛋白的放射性多肽supgt;68/supgt;Ga‑DOTA‑PG01，能作为示踪剂用于ALK阳性肿瘤的活体显像，提出ALK融合基因阳性患者筛查及病理信息获取新方法。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及一种靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01及其制备方法与应用。

背景技术

我国癌症发病率、死亡率全球第一。基于基因的靶向治疗是目前肿瘤治疗最精准的方法，而开展靶向治疗的前提是筛选出特定基因阳性的人群。

间变性淋巴瘤激酶(ALK)是胰岛素受体家族的一种受体酪氨酸激酶，正常情况下只表达于神经系统，它与多种肿瘤的发生有着密切的联系。ALK蛋白的N端位于细胞膜外，C端位于胞内；胞外是受体区，胞内是激酶区。胞内的激酶区是ALK发挥激酶功能的主要结构域，可激活多个细胞内信号通路，包括JAK-STAT、PI3K-AKT、mTOR及MAPK等信号通路，从而参与调节细胞生长、转化及抗细胞凋亡。在多种肿瘤中ALK的胞内激酶区发生重组、突变或扩增，引起下游信号通路的激活，导致癌细胞的增殖、生长和侵袭。

融合突变是ALK最常见的基因异位，在多种肿瘤中均发现ALK融合突变，如NSCLC患者中有3-7％发现ALK-EML4融合蛋白；在其他肿瘤如神经母细胞瘤、乳腺浸润性导管癌等肿瘤中，ALK融合已被证实为肿瘤发生的驱动基因。ALK融合基因已经成为多种肿瘤的特异性靶点。

目前检测ALK融合基因表达主要通过活检或组织学检测，但均存在一定局限性，如：有创性、不可能每个组织都能取得到样本、不能反应病变全貌等；因此，开发特异性靶向ALK融合蛋白的新型核素药物，发展无创、快速、精准检测基因的影像学方法，用于ALK阳性患者“伴随诊断”、获得活体分子病理信息，实现ALK阳性肿瘤的“精准制导”，具有重大的临床价值。

发明内容

本发明目的在于提供一种靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01及其制备方法与应用，公开一种靶向ALK融合蛋白的核素探针，实现基于核素探针的无创快速核医学影像检测ALK融合蛋白，解决当前主要通过活检或组织学检测ALK融合蛋白基因表达方法存在的局限性。

为达成上述目的，本发明提出如下技术方案：一种靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01。通过生物偶联技术将环状多肽PG01 N端的氨基与偶联剂DOTA-NHS进行缩合反应，得到多肽偶联物DOTA-PG01；所述多肽偶联物DOTA-PG01中的螯合剂DOTA与⁶⁸Ga螯合，构建靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01；

所述放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01的结构式如下所示：

所述靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01的氨基酸序列为：

Phe-cyclo(Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys)-Thr，

其中，环状结构由Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys通过两个半胱氨酸之间形成二硫键成环。