[发明专利]一种真菌多糖精化提纯工艺

说明书

本发明公开了一种真菌多糖精化提纯工艺，采用粉碎溶解和提取提取浓缩的方式制得多糖浓缩液，并通过盐酸洗涤、蒸馏水透析和丙酮、无水乙醚和乙醇洗涤的方式提高植物多糖的纯度，本发明的有益效果是：采用盐酸洗涤和蒸馏水透析的方式，去除多糖浓缩液中的蛋白质和低聚糖等小分子杂质，同时通过丙酮、无水乙醚和乙醇洗涤的方式，对多糖粉末中的色素进行吸收，从而到达对真菌多糖的精化提出操作。

技术领域

本发明涉及真菌多糖技术领域，具体为一种真菌多糖精化提纯工艺。

背景技术

真菌多糖一般是指各种真菌的子实体和菌丝体所产生的一类代谢产物，它可以刺激免疫活性，能增强网状内皮系统吞噬肿瘤细胞的作用，促进淋巴细胞转化，激活T细胞和B细胞，并促进抗体的形成，从而在一定程度上具有抗肿瘤的活性，对一些易发生广泛转移，不易采取手术治疗和放射疗法的白血病，淋巴瘤等，特别有价值；

目前真菌多糖提取的方法通常采用热水浸提法和酶法浸提法，其中热水浸提工艺简单，抽提的主要是胞外多糖，得率较低，而酶法浸提常采用纤维素酶、果胶酶和蛋白酶以除去胞壁和膜上的果胶、纤维素及蛋白质等成分，有利于胞壁内多糖的溶出，且多糖提出率高，但是无论是热水浸提法和酶法浸提法所提取的真菌多糖均为多糖粗粉，其内往往混杂着蛋白质、色素、低聚糖等杂质，导致在使用的过程中多糖的纯度降低，因此提出一种真菌多糖精化提纯工艺。

发明内容

本发明的目的在于提供一种真菌多糖精化提纯工艺，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案一种真菌多糖精化提纯工艺，包括以下步骤：

S1、取一定量的真菌菌丝体烘干后加入至粉碎机内粉碎，得到真菌原料菌丝；

S2、按料水比1:20向S1中得到的真菌原料菌丝中加入蒸馏水，并进行恒温水浴加热，得到真菌混合初液；

S3、将S2中得到的真菌混合初液进行过滤，再将得到的滤液与滤渣合并，之后再次进行过滤，如此提取浓缩得到真菌混合全液；

S4、将S3中得到的真菌混合全液加入至捣碎机中捣碎，并通过S3的方式再次进行提取浓缩，得到多糖浓缩液；

S5、在S4中得到的多糖浓缩液中加入盐酸，静置8-10小时,之后加入至离心机中进行离心8-10分钟，弃去沉淀，得到上清液；

S6、将S5中得到的上清液加入至透析袋中，并通过透析夹在液面2-3cm夹持透析袋，然后将透析带完全浸没在蒸馏水中，使用磁力搅拌器缓慢搅拌，得到透析液；

S7、使用丙醇和无水乙醚依次对S6中得到的初制沉淀进行洗涤，并挥干，再加入乙醇静置沉淀23-25小时，并过滤得到下部沉淀；

S8、将S7中得到的下部沉淀冷冻干燥得到多糖固体粉末。

作为本发明的一种优选方案：所述S1中的真菌原料菌丝需通过180-200目的筛选。

作为本发明的一种优选方案：所述S2中的恒温水浴加热温度需要控制在90-100℃，并持续2-3小时。

作为本发明的一种优选方案：所述S3中的提取浓缩操作需要重复3-4次，并保证真菌混合全液是真菌混合初液的1/3-1/4。

作为本发明的一种优选方案：所述S4中的捣碎操作需要保证菌丝体完全打碎，且保证提取浓缩后的多糖浓缩液为真菌混合全液的1/3-1/4。

作为本发明的一种优选方案：所述S5中盐酸浓度需要保证在2-2.2mol/L，并保证混合后的溶液PH值在3-3.5，且离心机在工作时需要保证转速在4000-4200r/min。

作为本发明的一种优选方案：所述S6中透析操作中，需要每10-12小时对蒸馏水进行更换，并重复3-4次。

作为本发明的一种优选方案：所述S7中的静置沉淀操作，需要在阴凉环境下进行。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：