[发明专利]一种酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白及其突变体和应用

权利要求书

1.一种酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白，其特征在于，通过将酵母胞嘧啶脱氨酶和高电荷α-螺旋结构域直接连接或通过一个或多个氨基酸连接获得，所述酵母胞嘧啶脱氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述高电荷α-螺旋结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.如权利要求1所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白，其特征在于，所述酵母胞嘧啶脱氨酶源于包括但不限于酿酒酵母或大肠杆菌的其他蛋白体系，所述高电荷α-螺旋结构域源于包括但不限于肌球蛋白、肌凝蛋白、蛋白激酶或高尔基体复合结构的其他α-螺旋结构。

3.如权利要求1所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白，其特征在于，所述酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白包括将酵母胞嘧啶脱氨酶的C末端通过直接或通过一个或多个氨基酸连接的方式与不同长度的高电荷α-螺旋结构域相连所获得的融合蛋白。

4.如权利要求3所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白，其特征在于，所述酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白包括SEQ ID NO.3所示的yCD-SAH、SEQ ID NO.5所示的yCD-RIELQ-SAH、SEQ IDNO.6所示的yCD-RIELQ、SEQ ID NO.7所示的yCD-RIELQ-1/8SAH、SEQ IDNO.8所示的yCD-RIELQ-1/4SAH、SEQ ID NO.9所示的yCD-RIELQ-1/2SAH和SEQ ID NO.10所示的yCD-RIELQ-3/4SAH。

5.如权利要求4所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白，其特征在于，所述酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白还包括与yCD-RIELQ-SAH相比具有至少50％同一性的氨基酸序列。

6.一种酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白突变体，其特征在于，与权利要求4所述的yCD-RIELQ-SAH相比突变位点位于R159、I160、E161、L162、Q163中的一个或几个氨基酸位点。

7.如权利要求6所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白突变体，其特征在于，所述酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白突变体的突变形式包括保守取代形式、增加和缺失一个和几个氨基酸的形式、氨基端截断的形式、羧基端截断的形式中的一种或多种。

8.一种药物组合物，其特征在于，包括至少一种权利要求1-5任一项所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白和/或至少一种权利要求6-7任一项所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白突变体和至少一种药学可接受的载剂或赋形剂。

9.权利要求1-5任一项所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白和/或权利要求6-7任一项所述的酵母胞嘧啶脱氨酶融合蛋白突变体和/或权利要求8所述的药物组合物在制备治疗肿瘤药物中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物还包括5-氟尿嘧啶的前药，所述5-氟尿嘧啶的前药选自由5-氟胞嘧啶、Toca FC、5-FC类似物、以及5-氟胞嘧啶、Toca FC、5-FC类似物的光活化性化合物、盐或酯组成的组。