[发明专利]一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的制备及在快速检测和高效杀灭金黄色葡萄球菌中的应用

权利要求书

1.一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的制备方法，其特征在于该制备方法具体是按以下步骤完成的：

一、将1,1,2,2-四(4-羧基苯)乙烯和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000溶解在四氢呋喃中，再加入去离子水，得到混合溶液Ⅲ；将混合溶液Ⅲ进行超声，然后在黑暗的通风橱中进行搅拌，去除四氢呋喃，再离心，使用去离子水对离心得到的固体产物进行清洗，再冷冻干燥，得到AIE纳米颗粒；将AIE纳米颗粒分散到去离子水中，得到AIE纳米颗粒溶液，并于4℃储存；

二、将含有EDC和NHS的生理盐水与AIE纳米颗粒溶液混合，再在室温下孵育，孵育后再使用生理盐水洗涤，得到EDC/NHS介导的AIE纳米颗粒；将EDC/NHS介导的AIE纳米颗粒重悬到生理盐水中，加入3-氨基苯硼酸，得到混合溶液Ⅳ；将混合溶液Ⅳ在室温下搅拌，最后使用生理盐水洗涤，去除3-氨基苯硼酸，得到APBA-AIE NPs，即为硼酸修饰的AIE纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的制备方法，其特征在于步骤一中所述的AIE纳米颗粒溶液中AIE纳米颗粒的浓度为1mg/mL；步骤一中所述的混合溶液Ⅲ中1,1,2,2-四(4-羧基苯)乙烯、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、四氢呋喃与去离子水的质量体积比为0.5g:1g:1mL:9mL；步骤一中所述的超声为使用微尖探头超声波粉碎机超声处理20min～30min，所述的微尖探头超声波粉碎机的输出功率为180W；步骤一中在黑暗的通风橱中进行搅拌，搅拌的速度为500r/min～600r/min，搅拌的时间为10h～12h，去除四氢呋喃，再离心，使用去离子水对离心得到的固体产物进行清洗3次～5次，再在-50℃下冷冻干燥10h，得到AIE NPs，即为AIE纳米颗粒。

3.根据权利要求1所述的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的制备方法，其特征在于步骤二中所述的含有EDC和NHS的生理盐水中EDC的浓度为2mg/mL，NHS的浓度为2mg/mL；步骤二中所述的含有EDC和NHS的生理盐水与AIE纳米颗粒溶液的体积比为1:1；步骤二中所述的混合溶液Ⅳ中EDC/NHS介导的AIE纳米颗粒、3-氨基苯硼酸与生理盐水的质量体积比为1mg:2mg:1mL；步骤二中将混合溶液Ⅳ在室温下搅拌30min，最后使用生理盐水洗涤3次～5次，去除3-氨基苯硼酸，得到APBA-AIE NPs，即为硼酸修饰的AIE纳米颗粒。

4.根据权利要求1所述的制备方法制备的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的应用，其特征在于一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒在快速检测金黄色葡萄球菌中应用。

5.根据权利要求4所述的制备方法制备的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的应用，其特征在于一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒快速检测金黄色葡萄球菌是按以下步骤完成的：

将含有金黄色葡萄球菌溶液与免疫球蛋白功能化Fe₃O₄溶液混合均匀，得到反应体系Ⅰ；将反应体系Ⅰ在37℃下孵育30min～120min，然后磁选分离，得到反应液；向反应液中加入硼酸修饰的AIE纳米颗粒，得到反应体系Ⅱ；将反应体系Ⅱ在37℃下孵育30min，再磁选分离，得到待检测溶液；使用荧光分光光度计分别检测待检测溶液和不含金黄色葡萄球菌的空白溶液的荧光强度，如果待检测溶液的荧光强度低于不含金黄色葡萄球菌的空白溶液的荧光强度，说明待检测溶液中含有金黄色葡萄球菌；

所述的反应体系Ⅰ中金黄色葡萄球菌的浓度为10～10⁶CFU/mL，免疫球蛋白功能化Fe₃O₄的浓度为400μg/mL；

所述的反应体系Ⅱ中硼酸修饰的AIE纳米颗粒的浓度为200μg/mL。

6.根据权利要求1所述的制备方法制备的一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒的应用，其特征在于一种硼酸修饰的AIE纳米颗粒在高效杀灭金黄色葡萄球菌中应用。