[发明专利]一种抑制WSSV感染的囊泡相关膜蛋白7及其应用

说明书

本发明涉及一种抑制WSSV感染的囊泡相关膜蛋白7及其应用，编码抑制WSSV感染的囊泡相关膜蛋白7的基因Cq‑VAMP7的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，囊泡相关膜蛋白7的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。Cq‑VAMP7蛋白可通过促进自噬流显著抑制WSSV感染，以VAMP7为靶点制备抗WSSV感染新药开发应用中具有很好的潜在应用前景。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种抑制WSSV感染的囊泡相关膜蛋白7及其应用。

背景技术

白斑综合征病毒(White spot syndrome virus，WSSV)是对虾和螯虾等重要甲壳类养殖业最具危害性的病毒性病原之一，其累计致死率高达90％～100％，对水产甲壳动物养殖业造成了极大的经济损失，但迄今为止，依然缺乏针对白斑综合征的有效药物治疗或预防手段。

囊泡相关膜蛋白7(Vesicle-associated membrane protein 7,VAMP7)是一种跨膜蛋白，该蛋白是可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(SNARE)家族的成员，定位于晚期内体和溶酶体。已有文献证明了VAMP7在内体囊泡运输到溶酶体中发挥功能，以及参与多囊泡体与质膜的融合进而将外泌体释放到胞外。自噬是细胞中一种高度保守的降解途径，自噬体通过与溶酶体融合进而降解其中的货物，而VAMP7蛋白则是囊泡融合机制的关键分子。R-SNARE蛋白VAMP7主要定位于溶酶体，在哺乳动物和果蝇的自噬过程中特异性介导双膜自噬体和单膜溶酶体之间的融合事件，与Qbc-SNARE蛋白SNAP29、位于自噬体的Qa-SNARE蛋白Synaxin17，组装成一个膜桥接的四螺旋束SNARE复合体，为有效驱动膜融合提供机械推力。然而，至今未见VAMP7与病毒感染相关的报道。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的目的在于提供一种抑制WSSV感染的囊泡相关膜蛋白7及其制备方法和应用。

为此，在本发明的第一方面，本发明提出了一种编码抑制WSSV感染的囊泡相关膜蛋白7的基因Cq-VAMP7，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

根据本发明实施例，基因Cq-VAMP7的ORF序列长663bp，该基因编码的囊泡相关膜蛋白7定位于溶酶体并结合伴侣分子Cq-SNAP29。Cq-VAMP7基因被敲降后，可显著抑制Hpt细胞自噬流，并促进WSSV复制及增殖；由此说明，Cq-VAMP7蛋白可通过促进自噬流显著抑制WSSV感染。

在本发明的第二个方面，本发明提出上述囊泡相关膜蛋白7，其氨基酸序列如SEQID NO:2所示。

在本发明的第三个方面，本发明提出上述囊泡相关膜蛋白7在制备抗动物WSSV感染的药物中的应用。

根据本发明实施例，囊泡相关膜蛋白7在被敲降后，可显著抑制Hpt细胞自噬流，并促进WSSV复制及增殖；由此说明，Cq-VAMP7蛋白可通过促进自噬流显著抑制WSSV感染，以VAMP7为靶点制备抗WSSV感染新药开发应用中具有很好的潜在应用前景。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

图1为根据本发明实施例的Cq-VAMP7蛋白结构域预测；

图2为根据本发明实施例的Cq-VAMP7蛋白定位于溶酶体的共聚焦显微镜观察图；

图3为根据本发明实施例的抗体检测Cq-VAMP7与Cq-SNAP29互作；

图4为根据本发明实施例的Western blot检测图；

图5为根据本发明实施例的病毒拷贝量数据。

具体实施方式