[发明专利]广谱的蛋白稳定保存液、其制备方法及应用

说明书

本发明提供了一种广谱的蛋白稳定保存液、其制备方法及应用。所述蛋白稳定保存液主要成分含有两亲嵌段高分子、离子液体及抗菌肽；较佳地还含有蔗糖。利用本发明的蛋白稳定保存液保存蛋白质，可有效防止蛋白质降解、减少污染，从而维持蛋白质的稳定性，适用于长期保存。本发明的蛋白稳定保存液的组分还具有协同增效效果，从而更有利于维持蛋白质的稳定性。

技术领域

本发明属于生物技术领域；更具体地，本发明涉及一种广谱的蛋白稳定保存液、其制备方法及应用。

背景技术

蛋白质是由一个或多个氨基酸残基构成的多肽链组成的大分子或大型有机分子，相对分子量可为几千至几百万Da，多肽链中氨基酸残基的羧基和氨基通过肽键共价连接，经过折叠形成独特的三维构象，从而具有独特的功能性，当蛋白失去其天然结构则其功能性也会失去。

常见抗体或酶均为蛋白质，在室温或者4℃长期保存，其活性会发生降低/破坏。蛋白在溶液中结构是动态变化的，当温度较低时，蛋白分子热运动较低，内部的弱成键不容易断裂，此外，低温下微生物也不容易生长；温度较高时，更快更猛烈的振动会破坏氢键以及疏水相互作用和范德华力，导致蛋白失去三维结构并展开失活。所以，常用的蛋白保存方法是进行冷冻，但是每次冻融都会降低抗体的结合能力或是酶活性，反复冻融还可能导致抗体形成聚集体。

另一种方案是加入载体蛋白例如牛血清白蛋白(BSA)，但是有一些抗体或酶在冷冻和添加BSA的状态下依然会不稳定。

因此，本领域需要开发新的提高蛋白稳定性的方法或成分。

发明内容

本发明的目的在于提供一种广谱的蛋白稳定保存液、其制备方法及应用。

在本发明的第一方面，提供一种稳定保存蛋白的方法，包括：将蛋白与稳定保存液进行混合，其中所述稳定保存液包括：两亲嵌段高分子、离子液体及抗菌肽；

所述两亲嵌段高分子为其中m为85～105的正整数，n为25～35的正整数；较佳地其分子量M_n为12700～14500；

所述离子液体包括：胆碱阳离子与羟基乙酸合成的离子液体[Cho][Gly]、胆碱阳离子与乳酸合成的离子液体[Cho][Lac]，或其组合。

在一种或多种较佳实施方式中，所述抗菌肽包括：Ranalexin，LL37，Parasin I，或其组合。

在一种或多种较佳实施方式中，所述稳定保存液还包括：蔗糖。

在一种或多种较佳实施方式中，所述稳定保存液中，组分之间发生协同增效；较佳地，所述离子液体促进所述抗菌肽的抑制活性。

在一种或多种较佳实施方式中，各组分的量包括：

在一种或多种较佳实施方式中，所述组分包含在缓冲液中。

在一种或多种较佳实施方式中，所述缓冲液的pH 7.4±0.3，较佳地pH 7.4±0.2或pH 7.4±0.1。

在一种或多种较佳实施方式中，抗菌肽等电点大于7。

在一种或多种较佳实施方式中，所述蛋白包括结构蛋白或功能蛋白，例如(但不限于)：功能蛋白、抗体、酶等。

在本发明的另一方面，提供一种蛋白稳定保存液，包括以下组分：两亲嵌段高分子、离子液体及抗菌肽；

所述两亲嵌段高分子为其中m为85～105的正整数，n为25～35的正整数；较佳地其分子量M_n为12700～14500；

所述离子液体包括：胆碱阳离子与羟基乙酸合成的离子液体[Cho][Gly]、胆碱阳离子与乳酸合成的离子液体[Cho][Lac]，或其组合。