[发明专利]一种基于KFERQ序列的药物控制系统及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种基于KFERQ序列的药物控制系统，其特征在于，所述药物控制系统由KFERQ序列、HCV-NS3序列和蛋白靶向序列重组而成，其中，所述蛋白靶向序列在重组序列的N端或C端。

2.根据权利要求1所述的基于KFERQ序列的药物控制系统，其特征在于，所述HCV-NS3序列为由Cleavage site与相邻HCV-NS3组成的一个元件。

3.根据权利要求1所述的基于KFERQ序列的药物控制系统，其特征在于，所述药物控制系统为KFERQ-mHCV-NS3序列和蛋白靶向序列重组而成。

4.根据权利要求1所述的基于KFERQ序列的药物控制系统，其特征在于，所述蛋白靶向序列是内源性蛋白序列，为细胞内过表达的EGFP序列、内源性AKT序列、内源性pAKT序列中的任一种。

5.根据权利要求1所述的基于KFERQ序列的药物控制系统，其特征在于，所述药物为ASV。

6.权利要求1-5任一项所述的基于KFERQ序列的药物控制系统的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：以FV185为质粒载体，先将HCV-NS3序列序列与KEFRQ序列进行重组，得到KFERQ-mHCV-NS3或HCV-NS3-KFERQ重组序列，然后在所得重组序列的N端或C端插入蛋白靶向序列，即得重组质粒。

7.根据权利要求6所述的基于KFERQ序列的药物控制系统的构建方法，其特征在于，所述蛋白靶向序列为内源性AKT时，在C端插入GFPnanobody序列或2xAKTin序列。

8.根据权利要求6所述的基于KFERQ序列的药物控制系统的构建方法，其特征在于，所述重组质粒包括KFERQ-mHCV-NS3-蛋白靶向序列。

9.一种由权利要求1-5任一项所述的药物控制系统在降解外源性过表达的EGFP、降解内源性促癌蛋白中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，应用于降解细胞内过表达的EGFP时，将含蛋白靶向序列为EGFP的药物控制系统的质粒转染受体细胞6-8h后，加入ASV药物进行处理，继续培养24h，检测EGFP降解情况；应用于降解内源性促癌蛋白时，将蛋白靶向序列为2xAKTin的药物控制系统的质粒转染受体细胞6-8h后，加入ASV药物进行处理，继续培养24h，检测AKT、pAKT降解情况。