[发明专利]一种猫嵌杯病毒抗原试纸条检测试剂盒

权利要求书

1.一种杂交瘤细胞对，其特征在于，所述杂交瘤细胞对包括第一杂交瘤细胞株A-2株和第二杂交瘤细胞株A-5株。

2.权利要求1所述杂交瘤细胞对在检测猫嵌杯病毒抗原中的应用。

3.一种检测猫嵌杯病毒的抗体对，其特征在于，所述抗体对是单克隆抗体A-2株和A-5株，所述单克隆抗体A-2是由杂交瘤细胞A-2株分泌获得的；所述单克隆抗体A-5株是由杂交瘤细胞A-5株分泌获得的。

4.权利要求3所述抗体对在检测猫嵌杯病毒抗原中的应用。

5.一种检测猫嵌杯病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求3所述的抗体对。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还包括PVC底板、金标垫、样品垫和吸水垫。

7.权利要求6所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，以PVC背板为支撑物，在其上分别贴有样品垫、金标垫、硝酸纤维膜、吸水垫，其中金标垫采用聚酯膜，经含有1％BSA和1％吐温-20的PBS处理后，将制备好的胶体金标记单克隆抗体A-2金标垫部分，完毕，37℃烘干2h，硝酸纤维膜上包被有两条线：分别为质控线和检测线，其中检测线包被物为单克隆抗体A-5株浓度为1.6mg/mL，质控线包被物为纯化的兔抗鼠抗体浓度为2.1mg/mL，然后用Biodot划膜仪喷涂于硝酸纤维膜上，组装好后大板用切条机切成7-8mm的裸条备用。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述胶体金标记单克隆抗体A-2混合物的终浓度为10μg/mL。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述胶体金的制备方法如下：

(1)1％的氯化金水溶液1mL，加入99mL超纯水，配置成0.01％的HAuCl4溶液，加热至沸腾；

(2)加入1.5mL 1％柠檬酸三钠水溶液，继续搅拌加热沸腾2～5min，金黄色的氯金酸水溶液在2min内颜色发生迅速变化，由灰色变成黑色最后变成紫红色，继续煮沸20min得到稳定的胶体金溶液。

10.根据权利要求9所述的抗体检测试剂盒，其特征在于，所述抗体对与标记胶体金混合的方法如下：

(1)用0.2mol/L K2CO3溶液调节胶体金溶液至pH8.0，加入单克隆抗体A-2，混合物的终浓度为10μg/mL；

(2)然后将抗体对的溶液10000rpm 4℃离心15min，弃上清，用复溶液溶解浓缩沉淀，复溶液浓缩比例为125μL/mL；

(3)将浓缩后的胶体金复合物喷涂于胶体金垫内，喷涂量为15μL/cm。