[发明专利]一种诊断唯支持细胞综合症诊断试剂及试剂盒

说明书

本发明涉及一种唯支持细胞综合症诊断试剂及试剂盒。具体涉及检测LIN28A表达水平的试剂的应用和试剂盒。更具体地，涉及检测LIN28A表达水平在检测唯支持细胞综合症的应用以及一种用于唯支持细胞综合症诊断的试剂盒。临床样本检测结果显示，与对照组相比，唯支持细胞综合症患者睾丸组织中不表达LIN28A。因此，检测该基因表达变化的试剂可用于唯支持细胞综合症诊断。

技术领域

本发明涉及一种诊断唯支持细胞综合症诊断试剂及试剂盒，属于生物技术领域。

背景技术

睾丸各小叶内的曲细精管由生精上皮构成。生精上皮由支持细胞和5-8层生精细胞组成，曲细精管中进行精子发生。

精子发生包括生精细胞由曲细精管基底面移向管腔并最后释放精子进入管腔的过程。精子发生分为两个阶段：精子发生第一阶段，精原细胞有丝分裂产生初级精母细胞，初级精母细胞第一次减数分裂形成次级精母细胞，次级精母细胞第二次减数分裂形成包括圆形精子细胞在内的精子细胞。精子细胞包含与精子相同的单倍体DNA，但它不能使卵母细胞受精。精子发生第二阶段，圆形精子细胞变形成为成熟精子。成熟精子通过中心体向卵母细胞提供遗传物质，启动卵母细胞激活及受精。

病理使用国际通用的Johnsen评分评价睾丸生精功能，病理评分从高到低为10-1分反映睾丸生精状态，7分及以下没有精子，2分及以下没有精原细胞(见表1)。Johnsen评分为2分及以下的患者为唯支持细胞综合症(sertoli cell only syndrome，SCOS)。临床上三次精液450g离心10分钟后沉淀中均未发现精子定义为无精子症，无精子症分为OA(输精管梗阻引起的无精子症)和NOA(睾丸生精功能受损引起的无精子症)。OA无精子症患者可通过TESA(睾丸精子抽吸)获得精子后进行ICSI治疗而获得子代。约50％的NOA患者可通过micro-TESE(睾丸显微取精术)手术获得精子，但仍有约50％的NOA患者术后未能检测到成熟精子而不能获得子代，其中包含约40％的SCOS患者，所以约40％的SCOS患者需要通过micro-TESE侵入性手术才能确诊。这类患者睾丸曲细精管中没有精原细胞，而精原细胞是精子发生的源泉，所以这类患者不可能有精子，因此没有必要进行micro-TESE。

SCOS是指患者呈正常男性发育，睾丸体积缩小，超声影像呈非均匀回声，精液检测为无精症，病理表现为曲细精管内生精细胞缺如，仅有支持细胞的临床综合征，是属于睾丸性不育的一种组织学病理类型。Foresta等认为Y染色体的缺失突变是SCOS的重要遗传学原因(Foresta C,Ferlin A,Garolla A,et al.High frequency of well defined Y-chromosome deletions in idiopathic Sertoli cell only syndrome[J].Hum Reprod,1998,13(2):302-307)，目前其病因复杂，发病机制尚不清楚，且尚无有效的治疗方法。

尽管当前有大量研究尝试寻找micro-TESE中与获精率相关的因素，包括睾丸Johnsen评分、睾丸体积、FSH、睾酮、病因、是否做过精索静脉曲张手术，不育年限等，有文献报道Beclin-1在唯支持细胞综合征、生精阻滞及术中可见精子三类患者睾丸组织中表达量不同，也有报道显示精浆中lncRNA的不同表达模式可以评估micro-TESE获精率，但以上影响因素不能用于区分这三类患者，只能用于预测获精率。目前仍然缺乏检测方法检测SCOS，这部分患者只能通过micro-TESE才能确诊。