[发明专利]一种与绵羊免疫性状相关的分子标记及其应用在审
申请号: | 202310137142.1 | 申请日: | 2023-02-20 |
公开(公告)号: | CN116287299A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
发明(设计)人: | 王维民;韩坤潮;李发弟;张小雪;林长春;张煜坤;张德印;李晓龙;赵源;赵利明;徐丹;周步博;王江荟;程江博;李文馨 | 申请(专利权)人: | 民勤同泽农业有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙) 11498 | 代理人: | 王加岭;杨静 |
地址: | 733300 甘肃省武*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 绵羊 免疫 性状 相关 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种与绵羊免疫性状相关的分子标记,其特征在于,所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其第368bp位的S表示C或G,该突变导致了绵羊PLEKHH2基因在该位点的C/G多态性。
2.一对用于检测权利要求1所述分子标记的引物对,其特征在于,其包括正向引物F和反向引物R,所述正向引物F的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述反向引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.用于检测权利要求1所述分子标记的KASPar引物对,其特征在于,其包括正向引物AX、正向引物AY和反向引物C,所述正向引物AX的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,所述正向引物AY的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示,所述反向引物C的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
4.包含权利要求2或3所述引物对的检测试剂盒。
5.一种检测与绵羊免疫性状相关的分子标记的方法,其特征在于,所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其第368bp位的碱基S表示C或G,所述方法包括利用权利要求2或3所述引物对对绵羊全血基因组DNA进行扩增检测;对获得的扩增产物的多态性位点进行分型鉴定。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,分型鉴定方法为直接测序法、探针法、基因芯片法和KASP基因分型技术。
7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
S1、以绵羊全血为样品提取基因组DNA,利用引物对如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的引物对提取的基因组DNA进行PCR扩增,
S2、对上述PCR的扩增产物进行测序和序列分析,从而确定多态性位点的基因型。
8.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述包括如下步骤:
a)以绵羊全血为样品提取基因组DNA,利用SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的引物进行高通量水浴PCR扩增;
b)扩增结束后,采用KASP基因分型技术,通过BMG PHERAstar仪器检测荧光信号并查看分型结果。
9.权利要求1所述与绵羊免疫性状相关的分子标记、权利要求2所述的引物对、权利要求3所述的KASPar引物对或权利要求4所述的检测试剂盒或权利要求5-8中任一项所述方法在绵羊辅助育种中的应用。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,所述应用为挑选出高免疫力的绵羊品种。
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