[发明专利]一种羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法

权利要求书

1.一种羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将丝素蛋白溶解于熔融的1-丁基-3-甲基咪唑氯化物中，加入无水二甲基甲酰胺，再加入丁二酸酐于80-110℃进行反应，使丝素蛋白分子结构中的羟基被羧基化，反应结束后，先将反应液用水透析得到难溶性羧基化丝素蛋白，再将难溶性的羧基化丝素蛋白溶解在钙醇水三元溶液中，用超纯水再次透析，将透析液冷冻干燥得到水溶性羧基化丝素蛋白；

2)将步骤1)制备的羧基化丝素蛋白溶解于六氟异丙醇中配制成纺丝液，利用静电纺丝方法制备成中空神经导管；

3)将步骤1)制备的羧基化丝素蛋白和壳聚糖分别用水溶解，然后按羧基化丝素蛋白与壳聚糖重量比1-5:1的比例将两种水溶液混合，接着加入血管内皮生长因子使其浓度为0.5-5ng/ml，得到的载药水凝胶前体溶胶，向载药水凝胶前体溶胶中加入EDC和NHS使其浓度为0.05-0.2mol/L，混合均匀后将溶胶填充于步骤2)的中空神经导管中，放入35-45℃恒温箱培养5-30min，即得水凝胶复合神经导管。

2.如权利要求1所述羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法，其特征在于：所述丝素蛋白与丁二酸酐的质量比为1：1-5。

3.如权利要求1所述羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法，其特征在于：所述丝素蛋白与丁二酸酐的反应温度为90℃。

4.如权利要求1所述羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法，其特征在于，所述静电纺丝的参数为：纺丝液浓度为6-15％，流出速度为0.1-0.5mm/min，针管与接收板之间的电压为8-20KV，接收距离为10-25cm，环境温度为20-25℃，相对湿度为25-40％。

5.如权利要求1所述羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法，其特征在于：所述羧基化丝素蛋白与壳聚糖的重量比为3:1。

6.如权利要求1所述羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法，其特征在于：所述EDC和NHS的浓度为0.15mol/L。

7.如权利要求1所述羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法，其特征在于：培养时间为10min。

8.如权利要求1所述羧基化丝素蛋白水凝胶复合神经导管的制备方法，其特征在于：所述中空神经导管的内径为2-3mm，外径为3-5mm，长度为10-20mm。