[发明专利]一种化学成分限定培养基及应用

权利要求书

1.一种化学成分限定培养基，其特征在于，由氨基酸、脂类、维生素、糖类、有机化合物和无机化合物组成；

所述氨基酸的组分和用量为：

所述脂类的组分和用量为：

所述维生素的组分和用量为：

所述糖类的组分和用量为：

所述有机化合物的组分和用量为：

所述无机化合物的组分和用量为：

2.根据权利要求1所述的化学成分限定培养基，其特征在于，所述化学成分限定培养基由第一化学成分限定培养基和第二化学成分限定培养基组成，且所述化学成分限定培养基中所述第一化学成分限定培养基的质量百分比为10％-90％；所述第二化学成分限定培养基的质量百分比为90％-10％；

所述第一化学成分限定培养基的组分和用量为：

其中，所述氨基酸的组分和用量为：

所述脂类的组分和用量为：

所述维生素的组分和用量为：

所述糖类的组分和用量为：

所述有机化合物的组分和用量为：

所述无机化合物的组分和用量为：

所述第二化学成分限定培养基的组分和用量为：其中，所述氨基酸的组分和用量为：

所述脂类的组分和用量为：

所述维生素的组分和用量为：

所述糖类的组分和用量为：

所述有机化合物的组分和用量为：

所述无机化合物的组分和用量为：

3.根据权利要求2所述的化学成分限定培养基，其特征在于，所述化学成分限定培养基中所述第一化学成分限定培养基的质量百分比为33％-90％；所述第二化学成分限定培养基的质量百分比为67％-10％。

4.根据权利要求3所述的化学成分限定培养基，其特征在于，所述化学成分限定培养基中所述第一化学成分限定培养基的质量百分比为33％-50％；所述第二化学成分限定培养基的质量百分比为67％-50％。

5.如权利要求1至4任一项所述的化学成分限定培养基的制备方法，其特征在于，包括：在水中按照配比加入各组分进行溶解，并调节溶液的pH和渗透压，过滤得到所述化学成分限定培养基。

6.如权利要求1至4任一项所述的化学成分限定培养基在培养宿主细胞用于制备抗体、重组蛋白、疫苗、慢病毒包装中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述抗体包括：CD20、PD-1、VEGF、TNF-α、Her2、CD47中的任一种；

所述重组蛋白包括：重组人凝血因子VIII、重组人胰岛素、重组干扰素、重组白介素、重组粒细胞集落刺激因子、重组人生长激素中的任一种。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述宿主细胞包括如下A～C中的至少一个特征：

A.所述宿主细胞为哺乳动物细胞；

B.所述哺乳动物细胞选自HEK293细胞；

C.所述HEK293细胞选自Expi293细胞、Freestyle293细胞中的任一种。

9.一种高效瞬转表达方法，其特征在于，包括：

使用权利要求1至4任一项所述的化学成分限定培养基培养宿主细胞，得到细胞悬浮液；

将质粒和转染试剂混匀后加入所述细胞悬浮液中；

将所述细胞悬浮液继续培养，维持葡萄糖浓度在4g/L以上，当细胞活率低于70％时收获细胞和上清培养液，得到表达产物。

10.根据权利要求9所述的高效瞬转表达方法，其特征在于，所述质粒和所述转染试剂的质量比为1:1-1:3；

所述质粒和所述转染试剂混匀后孵育5-15min。