[发明专利](R)-β-红没药烯合酶CcTPS2和其编码基因及其应用

说明书

本发明公开了一种用于合成(R)‑β‑红没药烯的萜类合酶CcTPS的编码基因及其产物(R)‑β‑红没药烯作为抗菌和降脂药物的应用，属于合成生物学和天然药物化学技术领域。本发明从唇形科植物火把花出发，克隆并功能鉴定了一个合成(R)‑β‑红没药烯的萜类合酶CcTPS2编码基因，其核苷酸序列如Seq ID No.2所示，与表达载体pCold‑TF连接，构建成为能够在大肠杆菌中表达的重组质粒，再将重组质粒转化至大肠杆菌中构建成为工程细胞，实现了大肠杆菌异源合成化合物(R)‑β‑红没药烯，本发明构建的该基因工程细胞安全稳定，生产周期短，显示出其在应用开发中的重大价值。本发明提供的产物具有抗菌和脂肪抑制活性，能够在制备抗菌药物和减脂药物中应用。

技术领域：

本发明属于合成生物学和天然药物化学技术领域，具体涉及(R)-β-红没药烯倍半萜合酶及其编码基因，与其应用和其产物作为在制备抗菌和降脂药物中的应用。

背景技术：

萜类化合物为种类最多、化学结构变化最为丰富的一类天然产物，广泛存在于高等植物和微生物中，具有重要的经济和药用价值。倍半萜烯β-红没药烯具有R和S构型，通常存在于植物精油中。负责催化合成单产物(R)-β-红没药烯的萜类合酶编码基因及其应用尚未报道，其抗菌和脂肪抑制活性也未有文献报道。

发明内容：

本发明的目的是提供(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2和其编码基因cDNA序列及其应用，以及其产物作为在制备抗菌和降脂药物中的应用。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2，其为：

(1)Seq ID No.1所示氨基酸序列构成的蛋白；

(2)Seq ID No.1所示的氨基酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基且功能相同的衍生蛋白。

所述(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2的编码基因，其为：

(a)Seq ID No.2所示的核苷酸序列；

(b)Seq ID No.2所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或几个核苷酸且表达相同功能蛋白的核苷酸序列。

含有所述的CcTPS2编码基因的重组载体。

含有所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2编码基因的表达盒。

含有所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2编码基因的转基因细胞系。

含有所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2编码基因的重组菌。

所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2或其编码基因在制备含有(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌中的应用。

所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2或其编码基因在制备含有化合物(R)-β-红没药烯的发酵液中的应用，所述的应用是采用：构建含有编码所述基因的表达载体，将所述重组载体转化至大肠杆菌中，将获得的基因工程细菌进行发酵培养，得到含有(R)-β-红没药烯的发酵液。