[发明专利]一种靶向成纤维细胞激活蛋白的MR探针的制备方法

说明书

本发明涉及一种靶向成纤维细胞激活蛋白的MR探针的制备方法，该方法是将中间体DOTA‑FAPI‑04溶解于水中，先加入氯化钆，于100℃下回流搅拌约30分钟；再加入1M乙酸铵水溶液，调节pH=5.5~6.5，反应1小时后LC‑MS监测反应完全，经制备液相纯化后，即得终产物Gd‑DOTA‑FAPI‑04。本发明方法简单、易于实现，所得MR探针Gd‑DOTA–FAPI‑04的临床转化，将提高磁共振领域早期肿瘤的精准诊断水平，为患者早期治疗及取得良好的预后发挥重要作用。

技术领域

本发明涉及靶向探针技术领域，尤其涉及一种靶向成纤维细胞激活蛋白的MR探针的制备方法。

背景技术

恶性肿瘤是威胁人类健康的主要杀手，主要归因于不能早期诊断；药物靶向性差，药物抵抗以及对转移疗效差等。

分子影像（Molecular Imaging）是将现代影像技术与分子生物学结合产生的一门新兴学科。其以体内特定分子作为靶目标，可以在体外通过现代影像设备显示活体内分子水平的功能、代谢，通过图像直接显示细胞或分子水平的生理和病理过程。更重要的是分子影像能在分子水平发现疾病，提高早期诊断疾病的水平，真正达到疾病的早期诊断、早期治疗。

核磁共振成像(MRI)是一种无创的显像方法，具有分辨率高、无放射性辐射、长效成像等优点，用于临床医学上评估人体解剖结构和组织或器官的结构和功能，从而进行疾病诊断。而组织间以及组织与病变间弛豫时间的差别，是磁共振成像诊断的基础。但是MRI对微小组织的病灶、分子活动或者细胞活动时灵敏度并不高，因此，MRI增强检查通过静脉给予对比剂，人为改变组织与病变间TIWI或T2WI信号强度对比，可以提高疾病诊断的灵敏度。

目前，核磁共振（MR）通用的对比剂为含轧（Gd）的顺磁性螯合物，其主要通过缩短T1值，增加T1WI图像上病变与正常组织的信号强度对比，通过病灶的不同增强方式和类型，帮助病灶定位、定性。如传统的MR轧螯合对比剂轧特酸葡胺（Gd-DOTA），属于离子型非特异性细胞外液对比剂，通过采用顺磁性小分子造影剂等可以帮助提高成像的灵敏度和对比度。由于其主要通过病变强化模式即血供情况来诊断疾病，因此在肿瘤的诊断中缺乏特异性，容易引起漏诊和误诊。

肿瘤组织由实质细胞和间质细胞组成，目前MR新型探针基本都靶向肿瘤实质细胞，但研究表明，间质细胞占有更大的比例。癌相关成纤维细胞（Cancer-associatedfibroblasts, CAFs）是肿瘤细胞生长微环境中的主要的间质细胞，是肿瘤间质的重要组成部分。在肿瘤病灶内，肿瘤间质是非常丰富的，在有些肿瘤病灶中，其占比可高达整个肿瘤组织的90%，明显高于肿瘤实质细胞。癌相关成纤维细胞与正常纤维化存在明显的差别：前者特征性地高表达成纤维细胞激活蛋白（Fibroblast activationprotein, FAP），而后者此蛋白表达很少。90%以上的恶性肿瘤存在成纤维细胞激活蛋白选择性高表达，尤其是在以促结缔组织增生反应为特征的乳腺、结肠、胰腺肿瘤中表达更为显著，而在正常组织及良性肿瘤中几乎不表达。目前，FAP已经成为肿瘤诊治的重要靶点。成纤维细胞激活蛋白抑制剂（Fibroblast activation protein inhibitors, FAPIs）可与FAP特异性结合,选择性地靶向 FAP阳性的组织，据此可以对肿瘤间质进行显像。