[发明专利]一种特基拉芽孢杆菌、微生物菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种特基拉芽孢杆菌，其特征在于，特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)YP131，其保藏编号为：CGMCC No.26340，于2022年12月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

2.一种微生物菌剂，其特征在于，包含如权利要求1中所述的特基拉芽孢杆菌YP131。

3.根据权利要求2所述微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂中特基拉芽孢杆菌YP131浓度为1×10⁷～1×10⁸CFU/mL。

4.根据权利要求2所述微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂中特基拉芽孢杆菌YP131浓度为3×10⁷～7×10⁷CFU/mL。

5.一种如权利要求2至4任一项所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1，制备种子菌液：将特基拉芽孢杆菌YP131接种到LB培养液中，在28±3℃，振荡培养至少10h，取样测在600nm处的OD值，直到当OD值为0.8±0.05时结束培养，得到的混合菌液为种子菌液；

步骤2，发酵培养：将步骤1中的种子菌液以1:(300-700)体积比接种至LB培养液中发酵培养，在28±3℃，振荡培养10～14h，离心，取沉淀用灭菌水进行稀释得到菌悬液，且使得到菌悬液在600nm处的OD值为0.2，即制得微生物菌剂。

6.根据权利要求5所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1，制备种子菌液：将特基拉芽孢杆菌YP131接种到LB培养液中，在28±3℃，100～300rpm振荡培养至少10h，每隔1～3h在超净工作台中取样，测在600nm处的OD值，直到当OD值为0.8±0.05时结束培养，得到的混合菌液为种子菌液；

步骤2，发酵培养：将步骤1中的种子菌液以1:(400～600)体积比接种至LB发酵培养液中发酵培养，在28±3℃，100～300rpm振荡培养10～14h，离心，取沉淀用灭菌水进行稀释得到菌悬液，且使菌悬液在600nm处的OD值为0.2，即制得微生物菌剂。

7.根据权利要求5或6所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤2中将步骤1中的种子菌液以1:500体积比接种至LB发酵培养液中发酵培养。

8.根据权利要求5或6所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤2中离心步骤具体为在4000～6000rpm的条件下离心20～30min。

9.一种如权利要求2至4任一项所述微生物菌剂的应用，其特征在于，用于拮抗胡萝卜软腐果胶杆菌。

10.根据权利要求9所述微生物菌剂的应用，其特征在于，用于预防和/或治疗由胡萝卜软腐果胶杆菌猕猴桃致病变种引起溃疡病。