[发明专利]长链非编码RNA ENST00000435702及其应用

说明书

本发明涉及医学生物检测技术领域，提供了长链非编码RNAENST00000435702的新用途，具体是在制备胰腺神经内分泌肿瘤诊断试剂盒以及制备抗胰腺神经内分泌肿瘤中的应用，本发明进一步提供了一种利用针对ENST00000435702的定量PCR检测来进行胰腺神经内分泌肿瘤诊断的试剂盒。本发明的试剂盒和检测方法简便，可靠，周期短，特异性高，易于临床推广。

技术领域

本发明涉及医学生物检测技术领域，涉及lncRNA作为分子标志物在胰腺神经内分泌肿瘤诊断及治疗中的应用，尤其涉及lncRNA中的ENST00000435702在制备胰腺神经内分泌肿瘤诊断试剂盒及治疗药物中的应用。

背景技术

神经内分泌肿瘤(neuroendocrine neoplasm，NEN)是起源于分布全身的神经内分泌细胞的少见肿瘤，其发病率在全球呈明显增长趋势。在我国，胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine neoplasm，pNEN)最为常见，占胰腺恶性肿瘤的第二位，仅次于胰腺导管腺癌。pNEN起病隐匿，生物学行为呈高度异质性，既可表现为惰性生长，亦可表现为侵袭性生长，甚至早期发生转移，且生物学特性可能随疾病进展而发生变化。目前pNEN的临床诊断仍以影像学检查为主，常用的血液CgA、NSE仅能用于评估肿瘤负荷和疗效，尚缺乏用于早期筛查的血液标志物。治疗方面仍以手术切除为主，但对于局部进展和远处转移的pNEN则以系统性药物治疗为主，包括生物治疗药物(生长抑素类似物)、靶向mTOR受体的依维莫司、抗血管生成的酪氨酸激酶抑制剂如舒尼替尼和索凡替尼，以及少数几种细胞毒化疗药物，目前可用的治疗靶点很少，并且上述药物极易出现耐药。因此，探索pNEN早期筛查诊断的血液标志物和有效的治疗靶点至关重要。

长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一种长度超过200个核酸、具有调控基因表达作用的非编码RNA，其在疾病的发生、发展过程中具有重要的生物学功能，可以通过表观遗传调控等方式影响肿瘤细胞的生长、凋亡、浸润与转移。近年来，已有越来越多的研究显示，lncRNA在包括肝癌、胰腺神经内分泌肿瘤、结直肠等多种消化道肿瘤中具有重要的诊断意义，并为肿瘤治疗提供了潜在的治疗靶标。目前lncRNA在NEN领域的研究尚少，因此，探索lncRNA作为pNEN的肿瘤标志物和肿瘤治疗的新靶点具有良好的研究及应用前景。

长链非编码RNA ENST00000435702是一种功能未知的非编码RNA，目前暂无文献报道其生物功能。本发明首次发现ENST00000435702在胰腺神经内分泌肿瘤患者血液和肿瘤组织中高表达，且ENST00000435702在胰腺神经内分泌肿瘤中具有显著的促癌作用，有望成为胰腺神经内分泌肿瘤的筛查标志物和药物靶标。

发明内容

本发明的目的在于提供胰腺神经内分泌肿瘤的诊断标志物，也在于提供LncRNA中ENST00000435702的新用途，即在制备胰腺神经内分泌肿瘤诊断试剂盒以及治疗药物中的应用。

本发明的第一方面，提供了ENST00000435702以及其作为胰腺神经内分泌肿瘤诊断标志物的应用，其多核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明的第二方面，提供了检测长链非编码RNA ENST00000435702表达量的试剂在制备胰腺神经内分泌肿瘤诊断试剂盒中的应用。

优选的，所述诊断试剂盒包含了检测生物样品中ENST00000435702表达量的试剂。

所述的检测生物样品中ENST00000435702表达量的试剂选自对ENST00000435702具有检测特异性的PCR引物，引物序列如下所示：

其中，引物SEQ ID NO.2～3用于实时定量PCR，引物SEQ ID NO.10～11用于扩增全长片段。

优选的，所述的生物样品获自对象的外周血。