[发明专利]一种红细胞冻干工艺、冻干红细胞和复水方法在审

专利信息
申请号: 202310223164.X 申请日: 2023-03-09
公开(公告)号: CN116195578A 公开(公告)日: 2023-06-02
发明(设计)人: 刘永兴 申请(专利权)人: 北京朴汇细胞生物科技有限公司
主分类号: A01N1/02 分类号: A01N1/02;C12N5/078
代理公司: 北京维正专利代理有限公司 11508 代理人: 曹蓉
地址: 101300 北京市顺义区金航西路4*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 红细胞 工艺 方法
【权利要求书】:

1.一种红细胞冻干工艺,其特征在于,包括红细胞预处理、冷热循环处理;

其中,所述冷热循环处理为:将所述红细胞预处理获得的预处理红细胞在39±2℃下保存5-20min,然后在4±2℃下保存5-20min;重复上述操作2-8次,获得细胞悬液。

2.根据权利要求1所述的红细胞冻干工艺,其特征在于,所述红细胞预处理的具体步骤为:将红细胞与冻干保护剂A进行混合,获得预处理红细胞;

所述冻干保护剂A包括以下组分中的一种或几种:EGCG 35-38mg/100mL、羟基四氢嘧啶455-475mg/100mL、维生素C 460-500mg/100mL、依达拉奉0.15-0.23mg/100mL、槲皮苷0.20-0.27mg/100mL、乙酰半胱氨酸465-485mg/100mL、四氢嘧啶455-470mg/100mL、海藻糖55-60g/100mL,溶剂为磷酸盐缓冲液PBS。

3.根据权利要求1所述的红细胞冻干工艺,其特征在于,所述红细胞冻干工艺还包括再处理步骤,具体为:向所述细胞悬液中加入冻干保护剂B,获得红细胞样品;

所述冻干保护剂B包括以下组分中的一种或几种:EGCG 17-20mg/100mL、羟基四氢嘧啶450-480mg/100mL、右旋糖酐28-35g/100mL、麦芽糖28-35g/100mL,溶剂为磷酸盐缓冲液PBS。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的红细胞冻干工艺,其特征在于,所述红细胞冻干工艺还包括冷冻步骤和干燥步骤;所述冷冻步骤为:将所述红细胞样品在-80±2℃下保存,获得冷冻红细胞样品。

5.根据权利要求4所述的红细胞冻干工艺,其特征在于,所述干燥步骤为:将冷冻红细胞样品首先在真空度为1-3Pa、隔板温度为-(30-50)℃的条件下进行一次冻干,时间≥12h;然后升高隔板温度到10-20℃,升温速率为0.05-0.22℃/min,并在此温度下保温1h以上,从而获得冻干红细胞。

6.一种利用权利要求1-5中任一向所述的红细胞冻干工艺获得的冻干红细胞。

7.一种复水方法,其特征在于,采用复水液对权利要求6所述的冻干红细胞进行复水,获得复水后红细胞;所述复水液包括复水液R1

复水液R1包括以下组分中的一种或几种:EGCG溶液、维生素C溶液、右旋糖酐水溶液、麦芽糖水溶液。

8.根据权利要求7所述的复水方法,其特征在于,所述复水方法具体包括以下步骤:将复水液R1加入至所述冻干红细胞中,直至所述冻干红细胞溶解,获得复水后红细胞。

9.根据权利要求8所述的复水方法,其特征在于,所述复水方法还包括以下步骤:向所述溶解后的冻干红细胞中再加入复水液R2

所述复水液R2包括以下组分中的一种或几种:EGCG溶液、维生素C溶液、右旋糖酐磷酸盐缓冲液、麦芽糖磷酸盐缓冲液。

10.一种利用权利要求7-9中任一项所述的复水方法获得的复水后红细胞。

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