[发明专利]免疫制剂及其应用

说明书

本发明提供了一种免疫制剂及其应用，涉及生物技术领域。本发明提供的免疫制剂，包括免疫微球和弗氏佐剂；免疫微球包括微球和抗原，微球与抗原共价键偶联；微球包括甲基硅烷微球和无机二氧化硅微球。该免疫制剂，通过偶联有抗原的微球和弗氏佐剂的协同配合作用，大大增加了抗原在动物体内的有效位点暴露，能够快速且高效诱发动物体内免疫应答，加速抗体开发过程，能够用于抗体制备的前期动物免疫。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种免疫制剂及其应用。

背景技术

抗原是能够刺激动物机体产生免疫应答的外源性物质。免疫佐剂，本身不具抗原性，但同抗原一起刺激机体后，能增强免疫效果。免疫佐剂的生物学作用包括：(1)改变抗原的物理性状，减缓抗原物质的释放，延长抗原的作用时间；(2)增加抗原表面积，利于巨噬细胞的吞噬；(3)能够刺激巨噬细胞对抗原的处理；(4)促进淋巴细胞间的连接，增强辅助性T淋巴细胞的作用；(5)可刺激致敏淋巴细胞的分裂和浆细胞产生抗体；(6)可提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴度。

用抗原对动物(通常是小鼠)进行免疫是单克隆抗体制备过程的第一步，也是至关重要的一步。动物对抗原免疫应答反应是否良好，能否产生滴度高，特异性好的抗体直接决定了后期筛选单克隆杂交瘤细胞株的难度和所获抗体的有效性。而免疫佐剂和免疫方案是动物能否产生良好免疫应答反应的重要因素。使用传统弗氏佐剂和配套免疫方案耗时长，如何缩短免疫周期成为加速抗体开发的一个重要部分。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种免疫制剂，以解决上述问题中的至少一种。

本发明的第二目的在于提供上述免疫制剂在抗体制备中的应用。

第一方面，本发明提供了一种免疫制剂，包括免疫微球和弗氏佐剂；

所述免疫微球包括微球和抗原，微球与抗原共价键偶联；

所述微球包括甲基硅烷微球和/或无机二氧化硅微球。

作为进一步技术方案，所述微球包括粒径为200-400nm的甲基硅烷微球、粒径为400-600nm的甲基硅烷微球和粒径为100-300nm的无机二氧化硅微球；

所述粒径为200-400nm的甲基硅烷微球、粒径为400-600nm的甲基硅烷微球和粒径为100-300nm的无机二氧化硅微球的质量比为(1-2)：(2-5)：(1-2)。

作为进一步技术方案，所述微球包括粒径为300nm的甲基硅烷微球、粒径为500nm的甲基硅烷微球和粒径为200nm的无机二氧化硅微球；

所述粒径为300nm的甲基硅烷微球、粒径为500nm的甲基硅烷微球和粒径为200nm的无机二氧化硅微球的质量比为1:2:1。

作为进一步技术方案，所述微球表面羧基化修饰，通过微球表面的羧基与所述抗原偶联。

作为进一步技术方案，每2mg甲基硅烷微球偶联30-50μg抗原；

每2mg无机二氧化硅微球偶联20-40μg抗原。

作为进一步技术方案，每2mg甲基硅烷微球偶联40μg抗原；

每2mg无机二氧化硅微球偶联30μg抗原。

作为进一步技术方案，所述抗原包括CRP抗原。

作为进一步技术方案，所述免疫微球与佐剂的比例为1mg：0.5mL-5mg：0.5mL。

作为进一步技术方案，所述免疫微球与佐剂的比例为2mg:0.5mL。

第二方面，本发明提供了上述免疫制剂在抗体制备中的应用。