[发明专利]保健品中利血平的快速检测装置及其制备与应用

说明书

本发明公开了保健品中利血平的快速检测装置及其制备与应用，涉及利血平半抗原、抗原、抗体、胶体金层析检测装置及其制备和检测保健品中利血平的应用。本发明提供由利血平半抗原偶联载体蛋白制备的人工抗原，以及免疫实验动物后使其机体产生的特异性针对利血平的抗体，效价高，其IC50值为2.51 ng/mL。本发明提供的免疫学检测方法针对保健品中的利血平，具有灵敏度高、特异性强、成本低、操作简单、检测时间短、可实现现场快速检测等优点，能更好的满足监管部门、检测机构现场监督执法的需要。

技术领域

本发明涉及检测技术领域，更具体地，本发明涉及一种保健品中利血平的快速检测装置及其制备与应用。

背景技术

降压类西药降压疗效迅速，但长期使用会产生某些副作用，患者希望服用副作用小的中成药。造假者为迎合患者的这一需求，在一些降压中成药及保健品中擅自添加氢氯噻嗪、利血平、盐酸可乐定、硝苯地平等降压西药。患者误认为中成药属天然中药不知其中添加了西药，如再与西药降压药同服，往往使血压骤然下降或发生较大波动，还易加重肾损害诱发中风甚至造成生命危险。BJS 201710《保健食品中75种非法添加化学药物的检测》中将利血平列为重要检测物质之一。加强对中成药及保健品添加化学药品鉴别方法的分析研究，可以进一步提高药品监督管理部门对流通环节中假劣中成药及保健品的查处，使制售假药的违法行为得到有效扼制。

目前，关于利血平的检验方法主要有高效液相色谱法、液相色谱串联质谱法、薄层色谱法、分光光度法、毛细管色谱法等。专利申请号为201310082621.4，专利名称为一种测定利血平含量的高效液相色谱方法的发明专利，公开了使用高效液相色谱法对利血平制剂及原料药中利血平的含量进行准确测定。但是上述采用大型仪器的检测方法具有操作繁琐、检验时间长，不满足现场快速检测需求的问题。

因此，亟需设计和开发出合适的利血平半抗原，并由此建立保健品中利血平的快速检测方法，实现通过免疫学方法来快速检测保健品及中成药中的利血平，以满足药品监督管理部门对中成药及保健品进行快速检测的需求。

发明内容

本发明的目的在于提供了利血平半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和检测方法，针对于保健品中的利血平进行快速检测。

根据本发明的一个方面，提供了利血平半抗原，其结构如式（Ⅰ）所示：

（Ⅰ）。

根据本发明的另一个方面，提供了制备利血平半抗原的方法，包括以下步骤：

S1. 将利血平、3-溴丙炔用DMF溶解，在-20℃下加入氢化钠，反应生成含有炔烃结构的中间体1，中间体1的结构式如下式所示，

；

S2. 将含有炔烃结构的中间体1与叠氮乙酸在七水硫酸铜催化下，生成带有稳定的三氮唑结构以及羧基结构的目标物，即制得式（I）所示的利血平半抗原。

在一些实施方式中，步骤S1中利血平、3-溴丙炔、氢化钠的摩尔比为1：（1~2）：（3~4）。

在一些实施方式中，步骤S2中中间体1与叠氮乙酸的摩尔比为1：（2~3）。

根据本发明的再一个方面，利血平抗原为利血平半抗原与载体蛋白的偶联物，载体蛋白为牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白。

根据本发明的第四个方面，利血平抗体是由利血平抗原经动物免疫制备得到，利血平抗体为利血平单克隆抗体。

根据本发明的第五个方面，提供了利血平半抗原、利血平抗原在利血平的免疫学检测中的应用。

根据本发明的第六个方面，检测装置为利血平胶体金层析检测卡，其中，检测装置包括NC膜、金标垫、样品垫、吸水垫以及PVC底板，NC膜上有检测区和质控区，检测区包被有利血平抗原，金标垫中含有胶体金标记的利血平抗体。