[发明专利]一种检测农药的比色传感器、其制备方法及应用在审
申请号: | 202310239563.5 | 申请日: | 2023-03-14 |
公开(公告)号: | CN116297429A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
发明(设计)人: | 侯秀丹;刘倩文;刘永超;杨庆利;葛家成 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N33/53;G01N33/543;G01N21/31 |
代理公司: | 山东三邦知识产权代理事务所(普通合伙) 37308 | 代理人: | 高洋 |
地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 农药 比色 传感器 制备 方法 应用 | ||
1.一种比色传感器,其特征在于,由捕获探针和信号探针组成;其中,捕获探针选自Au-SSM膜材料修饰的带有巯基的核酸适配体,即SH-aptamer-Au-SSM;信号探针选自AuPt@IL@Fe3O4纳米材料修饰的带有巯基的cDNA,即SH-cDNA-AuPt@IL@Fe3O4;
所述aptamer的核酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述cDNA的核酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述的比色传感器,其特征在于,所述捕获探针由如下方法制备而成:
首先,采用TCEP激活SH-aptamer,获得SH-aptamer激活体系;然后,将Au-SSM膜材料与SH-aptamer激活体系混合,加水,在37℃下孵育;待孵育结束后,洗涤除去未结合的单链SH-aptamer,加入1%牛血清蛋白封闭未结合位点,形成SH-aptamer-Au-SSM,即所述捕获探针。
3.根据权利要求2所述的比色传感器,其特征在于,所述Au-SSM膜材料由如下方法制备而成:
将金属网剪成小圆片,即获得SSM膜;然后将SSM膜置于稀盐酸中腐蚀,至产生小气泡后取出,清洗;将SSM膜加至3-氨丙基三乙氧基硅烷中,静置,清洗,烘干;然后将SSM膜加至HAuCl4中,先静置,再震荡,然后加冰硼氢化钠震荡,再静置,最后将SSM膜取出,烘干,得到Au-SSM膜材料。
4.根据权利要求1所述的比色传感器,其特征在于,所述信号探针由如下方法制备而成:
首先,采用TCEP激活SH-cDNA,获得SH-cDNA激活体系;然后,将AuPt@IL@Fe3O4重悬于水中,获得AuPt@IL@Fe3O4溶液;然后,将SH-cDNA激活体系加入到AuPt@IL@Fe3O4溶液中,在37℃下孵育;待孵育结束,将溶液磁分离,弃掉上清液,加水离心,除去未结合的单链SH-cDNA,加入1%牛血清蛋白封闭未结合位点,然后将沉淀冲洗分离,SH-cDNA-AuPt@IL@Fe3O4,即所述信号探针。
5.根据权利要求4所述的比色传感器,其特征在于,所述AuPt@IL@Fe3O4纳米材料由如下方法制备而成:
将Fe3O4分散在盐酸溶液中,超声,将Fe3O4颗粒磁分离出来,洗涤;然后将Fe3O4颗粒分散在含有乙醇、水和浓氨水的混合溶液中,加入正硅酸乙酯(TEOS),在室温下搅拌,得到SiO2@Fe3O4;将SiO2@Fe3O4磁分离出来,洗涤,然后分散在含有浓氨水的乙醇溶液中,搅拌,加入离子液体,室温搅拌反应,待反应结束后,磁分离收集反应产物,洗涤,得到IL@SiO2@Fe3O4;将IL@SiO2@Fe3O4与氢氧化钠混合反应,蚀刻SiO2层,磁分离收集反应产物,洗涤,干燥,获得IL@Fe3O4;将IL@Fe3O4分散在柠檬酸三钠溶液中,超声,加入HAuCl4溶液和柠檬酸三钠溶液,煮沸至溶液呈酒红色,之后加入氯铂酸钾和L-抗坏血酸,煮沸至溶液颜色为红棕色,获得AuPt@IL@Fe3O4溶液;将AuPt@IL@Fe3O4溶液离心,弃掉上清液,获得AuPt@IL@Fe3O4纳米材料。
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