[发明专利]一种磁珠保存液、制备方法及其使用方法在审

专利信息
申请号: 202310246776.0 申请日: 2023-03-15
公开(公告)号: CN116334072A 公开(公告)日: 2023-06-27
发明(设计)人: 翁国武;翁浩儒;季昱;肖艳平;宋莲;周海军 申请(专利权)人: 南京中科拜尔医学技术有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 210038 江苏省南京市南京经*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 保存 制备 方法 及其 使用方法
【说明书】:

发明提供了一种磁珠保存液,包括保存液A和保存液B;其中,所述保存液A包括缓冲液、蛋白质、增稠剂A、表面活性剂、甲基丙烯酸十二酯和防腐剂;所述保存液B包括有机溶剂、增稠剂B;所述增稠剂A为蛋白胨;所述增稠剂B为硅酸铝土、蒙脱土、膨润土中的一种或多种;采用由缓冲液、蛋白质、增稠剂A、表面活性剂、甲基丙烯酸十二酯和防腐剂组成的保存液A,以及,由有机溶剂、增稠剂B组成的保存液B作为磁珠保存液,同时采用一种磁珠保存液的使用方法,保障了磁珠长期储存后的分散性、不易结块,提取效率也比较稳定,为磁珠的长期储存提供保障。

技术领域

本发明涉及核酸提取技术领域,特别涉及一种磁珠保存液、制备方法及其使用方法。

背景技术

磁珠法核酸提取试剂是通过将生物技术和纳米材料技术相结合的产品,其中核酸提取磁珠是对具有超顺磁性的微粒表面进行化学修饰,使之与可以在一定的环境下与核酸结合,并利用纳米微球的超顺磁性,在外加磁场作用下,从血液、组织、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA,可应用在临床诊断、法医鉴定、微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。

磁珠一般是放入纯水或者添加了抑菌剂的缓冲液中保存,这两种保存的效果均非常有限,纯水中保存的保存期一般只有一周左右,添加了抑菌剂的缓冲液的保存期限也只有10天左右,之后磁珠会逐渐出现结块的现象,分散性变差,同时基团含量、磁饱和强度会下降,导致提取效果会快速的降低,为此,提出一种能够对磁珠进行长效保存的磁珠保存液。

发明内容

本发明的目的在于提供一种磁珠保存液,以解决现有技术中的问题。具体技术方案如下:

为实现上述目的及其他相关目的,本发明提供一种磁珠保存液,包括保存液A和保存液B;其中,

所述保存液A包括缓冲液、蛋白质、增稠剂A、表面活性剂、甲基丙烯酸十二酯和防腐剂;

所述保存液B包括有机溶剂、增稠剂B;

所述增稠剂A为蛋白胨;

所述增稠剂B为硅酸铝土、蒙脱土、膨润土中的一种或多种;

所述磁珠保存液由保存液A和保存液B混合制得,pH值在7.0-8.0。

优选的,所述保存液A的各组分的浓度为:20-100mmol/L缓冲液、5-50g/L蛋白质、100-160g/L增稠剂A、5-10g/L表面活性剂、20-40g/L甲基丙烯酸十二酯和适量的防腐剂;

所述保存液B由有机溶剂和增稠剂B按质量比1:1~4:1的比例混合制得;

所述保存液A和所述保存液B按质量比2:1~-6:1的比例混合制得所述磁珠保存液。

优选的,所述缓冲液独立为Tris-HCl缓冲液,缓冲液浓度为40-50mmol/L。

优选的,所述蛋白质具体为牛血清白蛋白、酪蛋白、明胶蛋白中的任意一种或多种,蛋白质的浓度为20-35g/L。

优选的,所述表面活性剂为曲拉通x-100、曲拉通x-405、吐温-20、吐温-80中的任意一种或多种,表面活性剂的浓度为1-2g/L。

优选的,所述防腐剂独立为Proclin300,防腐剂的浓度为1-2g/L。

优选的,所述保存液A中还包括有保护剂鲸蜡硬脂醇聚醚-25。

优选的,所述保护剂鲸蜡硬脂醇聚醚-25的浓度为1-10g/L。

本发明还提供了一种磁珠保存液的制备方法,包括以下步骤:

步骤1:将缓冲液、蛋白质、表面活性剂、甲基丙烯酸十二酯和防腐剂分别加入到水中,搅拌混匀,制得半成品;

步骤2:在步骤1制备的半成品中加入增稠剂A和蛋白质,并对半成品进行水浴加热至60℃,充分震荡混匀,完成保存液A的制备;

步骤3:将增稠剂B加入到试剂瓶中,将有机溶剂缓慢倒入增稠剂B中制备保存液B;

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